简介

微囊藻伪空胞基因丛的研究

简介

人芳香二烷基磷酸酯酶基因丛基因多态性快速分析法　目的建立一种人芳香二烷基磷酸酯酶(PON)基因丛等位基因快速分型法.方法在Multiplex-PCR-RELP基础上,通过引物设计错配,在一体系中同时扩增分别含PON1-192、PON1-55和PON2-311位密码子的DNA片段,当等位基因为PON1-192R/PON1-55L/PON2-311S时,PCR扩增产物中均被引入唯一的限制性内切酶HinfⅠ的识别位点G*ANTC.PCR扩增产物经酶消化,聚丙烯酰胺凝胶电泳后,相互分开的不同组合的片段,确认为不同的基因型组合,同时对3个位点进行基因分型.结果在检测的80例健康个体中,等位基因频率为PON1-192:Q46.9%,R53.1%;PON1-55:L95.6%,M4.4%;PON2-311:S78.8%,C21.2%.结论此方法快速分析3个位点的基因多态性,省时省力、节约经费,便于3个位点之间的连锁分析,具有推广价值.

微囊藻伪空胞基因丛的研究

微囊藻(Microcystissp.)是广泛分布于世界各地的单细胞蓝藻,多生长于湖泊和池塘中,在夏季易大量生长而形成水华,造成水环境恶化。在微囊藻细胞中,有一种特殊的由中空圆柱状气囊组成的结构——伪空胞能够为细胞提供浮力,使它们在水体中垂直迁移,获得适宜的生长条件,因而,对于微囊藻水华的暴发起到重要的作用。本研究比较了多个微囊藻株的伪空胞基因丛结构特点,探讨了它们的系统演化关系和表达差异,并对一种微囊藻中伪空胞基因丛的转录调控进行了初步研究。主要研究内容和研究结果分为四个部分:第一,微囊藻FACHB854伪空胞基因丛的获得。首先构建FACHB854的基因组文库,筛选得到了含有gvpA-gvpC基因的克隆;利用PCR、反向PCR和测序,最终获得包含10个不同的基因、约7.5kb的基因丛全长序列,其中gvpA有两个拷贝;用Southernblot杂交的方法证明,在FACHB854的基因组中仅存在这一个伪空胞基因丛。第二,微囊藻伪空胞基因丛的结构类型、演化关系和表达差异。