简介

影印接种法

简介

增大接种量是提高菌浓的有效、快捷的方法，但由于种子罐的体积已定，无法通过加大种子培养液的体积来增大接种量，因此选择通过倒种增大接种量，在生产实践中检验模型的预测能力。将对照与倒种的罐批发酵前期的菌浓与pH的最高值和最低值输入模型，预测60h的效价，结果见Tab.3，相对误差为2.5687%和-9.3267%，通过倒种法60h效价比对照提高了35.3%，放罐时效价为33773u/ml，比对照提高了11.8%。

改变培养基碳源――葡萄糖代替糊精50L罐上发酵生产头孢菌素C倒种法虽然是提高菌量的有效方法，但在实际操作中增大了染菌的风险，因此根据摇瓶实验的结果(数据未列出)，在50L罐上考察葡萄糖部分替代糊精后头孢菌素C的合成，以2%葡萄糖3%糊精代替原配方的5%的糊精，结果见Fig.2，在发酵前期pH迅速下降，下降后有两次反弹，最高值620，最低值56，62h后pH通过流加氨水控制在550。RQ值的变化反映了底物利用的转换，25h之前以葡萄糖和玉米浆中的还原糖为碳源，RQ值在09左右，之后以糖和豆油为混合碳源，表现在RQ值较之前降低，80h后完成糖与油利用的转换，完全以油为碳源，RQ值稳定在06～07之间直到放罐。整个发酵过程DO都控制在30%以上，不存在氧限制问题。将对照与葡萄糖代替糊精的罐批早期的菌浓和pH数据输入模型进行预测和验证，结果见Tab.4，相对误差分别是26876%和52653%。

影印接种法

具体过程是：将待测的悬液涂在合适的平板上，等其长好后作为母平板（每平板上的菌落控制在50～300个）；用一小块灭菌的丝绒固定在直径较平板略小的圆柱形木块上，构成印章（即接种工具）；然后把长有菌落的母平板倒置在丝绒的印章上，轻轻印一下；再把此印章在另一含有选择培养基的平板上轻轻印一下，经培养后，选择培养基平板上长出的菌落与母平板上的菌落位置对应，比较影印平板与母平板上菌落生长情况，即可从相应位置的母平板上选出待测的突变型菌落。影印法最初是为证明微生物的抗药性突变是自发的、与相应的环境因素无关而设计的实验，目前已广泛应用于营养缺陷型的筛选以及抗药性菌株筛选等研究工作中。