基本含义

HRM内容

HRM技术

HRM技术的发明

HRM 技术的基本原理

HRM 技术的必备条件

HRM的特点

HRM的应用(1 ．基因的突变扫描。 2 ． HLA 基因组配型 3 ．等位基因频率分析 4 ．物种鉴定、品种鉴定 5 ．甲基化研究 6 ．法医学鉴定、亲子鉴定)

HRM的技术优势

基本含义

HRM=Human Resource Manager.人力资源经理

HRM 是human resource management的缩写，是指人力资源管理（也叫HR管理）

HR-Human Resource人力资源,目标是让企业HR更好地进行人力资源的发展和规划。系统重点是实现人力资源部门在员工素质管理、薪资管理、绩效考核等方面的需求。

HRM内容

组织管理

主要实现对公司组织结构及其变更的管理；对职位信息及职位间工作关系的管理，根据职位的空缺进行人员配备；按照组织结构进行人力规划、并对人事成本进行计算和管理，支持生成机构编制表、组织结构图等。

人事信息管理

主要实现对员工从试用、转正直至解聘或退休整个过程中各类信息的管理，人员信息的变动管理，提供多种形式、多种角度的查询、统计分析手段。

招聘管理

实现从计划招聘岗位、发布招聘信息、采集应聘者简历，按岗位任职资格遴选人员，管理面试结果到通知试用的全过程管理。

劳动合同

提供对员工劳动合同的签订、变更、解除、续订、劳动争议、经济补偿的管理。可根据需要设定试用期、合同到期的自动提示。

培训管理

根据岗位设置及绩效考核结果，确定必要的培训需求；为员工职业生涯发展制定培训计划；对培训的目标、课程内容、授课教师、时间、地点、设备、预算等进行管理，对培训人员、培训结果、培训费用进行管理。

考勤管理

主要提供对员工出勤情况的管理，帮助企业完善作业制度。主要包括各种假期的设置、班别的设置、相关考勤项目的设置，以及调班、加班、公出、请假的管理、迟到早退的统计、出勤情况的统计等。提供与各类考勤机系统的接口，并为薪资管理系统提供相关数据。

绩效管理

通过绩效考核可以评价人员配置和培训的效果、对员工进行奖惩激励、为人事决策提供依据。根据不同职位在知识、技能、能力、业绩等方面的要求，系统提供多种考核方法、标准，允许自由设置考核项目，对员工的特征、行为、工作结果等进行定性和定量的考评；

福利管理

福利管理系统提供员工的各项福利基金的提取和管理功能。主要包括定义基金类型、设置基金提取的条件，进行基金的日常管理，并提供相应的统计分析，基金的日常管理包括基金定期提取、基金的补缴、转入转出等。此外，提供向相关管理机关报送相关报表的功能。

工资管理

工资管理系统适用于各类企业、行政、事业及科研单位，直接集成考勤、绩效考核等数据，主要提供工资核算、工资发放、经费计提、统计分析等功能。支持工资的多次或分次发放；支持代扣税或代缴税；工资发放支持银行代发，提供代发数据的输出功能，同时也支持现金发放，提供分钱清单功能。经费计提的内容和计提的比率可以进行设置。

HRM技术

高分辨率熔解曲线（high resolution melting，HRM） 是基于核酸的物理性质， 通过饱和染料监控核

酸的熔解曲线变化进行分析的一种技术。它是在常规PCR基础上增加一种饱和染料， 无需使用序列特异

性探针。HRM 检测不受突变碱基位点和种类的局限， 具有高灵敏度特异性、 简单方便、 成本低、 高通量

等优点， 可应用于基因分型、 短片段重复序列的分析、序列匹配、 突变扫描、 甲基化和RNA编辑等多方面。近年来它已为生命科学中的热点技术。

HRM技术的发明

HRM技术是由美国犹他大学保健科学中心病理学部Carl Wittwer实验室与美国Idaho公司于2003年共同合作开发出来的一种建立在实时荧光定量PCR基础上的技术，并于2006成功生产出世界上第一台商品化的HRM仪器HR-1。其中HRM技术的发明，还得先归功于先发明了饱和荧光染料LC Green，否则不可能实现HRM技术。

HRM 技术的基本原理

HRM 技术的基本原理主要是基于核酸分子物理性质的不同开发出来的。不同核酸分子的 GC 含量， GC 分布等是不同的，因此双链 DNA 分子在加热变性时会有自己熔解曲线的形状和位置。 HRM 技术的基本原理就是根据熔解曲线的不同对样品来进行区分。

以二倍体细胞为例，当纯和子样品通过 PCR 扩增，经过变性复性后，仍然是纯合子，如图一 A 。而杂合子 PCR 扩增完，经过变性复性后，样品中会形成部分的含有非沃森 - 克里克配对的双链分子存在。

如图一 B 所示，杂合子样品扩增后，经变性复性，会有非配对碱基的形成，而纯合子样品没有。这样，杂合子样品相对纯合子样品来说，双链不够稳定，表现在解链温度上就会有微小的差别。如果采用高分辨率的仪器进行检测，并用专门的软件进行分析，微小的差别就会被检测出来，从而成功的筛选出纯合子与杂合子。

下图是杂合子样品熔解曲线的的示意图：

图二：杂合子样品的熔解曲线为四种不同双链的熔解曲线的叠加的结果

以二倍体细胞为例，杂合子扩增后通过变性复性会形成二种同源双链和两种异源双链的混合物，在熔解过程中四种链会形成一条独特的溶解曲线，从而与纯合子的熔解曲线区分出来。

下图是采用 Lightscanner 仪器对纯合子，杂合子，双杂合样品的分析结果

图三 . 采用 Lightscanner 系统对标准样品的分析。

灰色的曲线代表的是纯合子样品，红色的曲线代表的是杂合子样品，蓝色的曲线代表的是双杂合样品，通过 Lightscanner 系统的分析，三种样品被明显的分为了三类，表现出了极高的灵敏性和准确性。

HRM 技术的必备条件

HRM 技术走向实践应用主要基于两种技术的改进 : 1. 双链 DNA 嵌入型饱和荧光染料 LCGreen 的开发， 2. 拥有精确控温装置和高密度数据采集本领的仪器的产生以及专业化分析软件的开发。

采用饱和的荧光染料是进行 HRM 分析的必备条件之一。 LCGreen 是饱和的荧光染料，与传统的荧光染料 Sybr Green 相比有如下优点： LCGreen 染料在 PCR 时可以以饱和的浓度加入，不会抑制 PCR 反应， Sybr Green 染料浓度过高会抑制 PCR 反应。在进行 HRM 分析时，由于饱和染料占据了 DNA 双链上每一对碱基上的空位，所以在双链解链时，染料立即与双链脱离，使得荧光信号发生较大的变化，而非饱和染料常发生位置上的迁移，从而对荧光信号没有大的影响。

下图显示了饱和荧光染料 LCGreen 和非饱和荧光染料 Sybr Green 的区别

图四 A ：非饱和染料 Sybr Green 在 DNA 双链熔解时会发生位置的迁移，饱和染料 LCGreen 在 DNA 双链熔解时则直接从双链上脱落下来。

图四 B ，使用饱和染料 LC Green 得到的 DNA 双链熔解峰可以很明显的将杂合子给区分出来。

HRM的特点

灵敏度高：杂合子突变体的检测的灵敏度可以达到100%，原则上数据分析时温度升高后纯合子或半合子的突变时检测不到的，但实际上，许多纯合子突变是可以检测到的。如基因突变正好与x连锁，可以在PCR之前加入已知野生型样本来检测半合子或纯合子的突变。

特异性好：HRM的特异性可以达到90-100%。短的扩增子特异性要更高

不受碱基位点局限，适用范围广

在封闭的试管内进行，可降低污染操作简单、

成本低廉、时间少、误差小、高通量检测

检测的样品范围广：HRM检测片段范围在38-1000bp不同来源的样品都可以用于HRM如血粉、口腔细胞、冷冻的肿瘤样品、也可用于酒精固定、福尔马林固定或石蜡包埋的组织等，在人类遗传性疾病的研究中，通常用周边血液淋巴细胞中提取DNA，用于HRM分析。

HRM的应用

1 ．基因的突变扫描。

检测杂合子 SNP 、区段 / 碱基缺失、前后重复、杂合子缺失。

相关研究方向：

1 ） 样本中特定突变位点（ SNP ）的筛查，包括一个片段中多个位点的复合杂合突变的 Genotyping 。

2 ） 疾病相关基因（癌基因）特定区段突变位点的扫描，新突变的发现。

3 ） 遗传育种中特定突变的筛查、未知突变的发现。

4 ） 植物抗逆性，突变与性状关联性的研究。

5 ） 动植物品质相关多态性位点的研究等。

例如：

1 ） 临床癌症病人特定 SNP 的高通量筛查。

2 ） 单碱基错译突变的筛查。

3 ） 新突变的寻找。

4 ） 植物遗传育种。

5 ） 大片段序列变化的检测。

2 ． HLA 基因组配型

器官移植的 HLA 配型、同胞之间 HLA 基因型确定。

如快速确定 HLA 高度多态性位点的类型，及非亲源关系个体间异源造血干细胞移植前的 HLA 基因型确认 。

3 ．等位基因频率分析

4 ．物种鉴定、品种鉴定

1 ） 微生物品种、物种快速鉴定。

2 ） 动植物品种鉴定。

5 ．甲基化研究

1 ） 甲基化位点的筛查。

2 ） 甲基化程度分析。

用 HRM 方法检测启动子区域内的甲基化，可检测低达 0.1% 的甲基化程度；并根据已知甲基化程度的标准曲线对未知样品的甲基化百分比进行测定。 HRM 是一种高灵敏度的甲基化检测方法，并且其高度的重复性和低成本将对肿瘤的研究和临床应用有很大帮助。

6 ．法医学鉴定、亲子鉴定

检测单核苷酸多态性 SNP 鉴定，插入 / 缺失多态性 DIP 鉴定等。将 HRM 用于法医学 SNP 、 DIP 鉴定，协助犯罪鉴定，亲子鉴定。相对于传统鉴定方法， HRM 是一种简单、便宜、高通量的二等位基因分子标记鉴定的方法。

HRM的技术优势

基于它与常规熔解曲线分析的方法类似，其操作方法也相当简便。在用HRM方法进行分析时，样品经PCR扩增后直接进行HRM，PCR产物无需再转入其它分析装置，而直接在同一个PCR管内进行分析，实现闭管操作。由于HRM完全是基于核酸的物理性质进行分析，因而无需序列特异性探针。基于这种检测原理，HRM检测不受突变碱基位点和种类的局限，既可以对未知突变进行筛查、扫描，又可以对已知突变进行分析，亦可用于短片段重复序列的分析，所需要的只是在常规PCR基础上增加一个饱和染料。所以，相比传统的SNP/突变分析法和定量探针法，简化了操作时间和步骤，大大降低了使用成本，并且拓展了其应用面。HRM在这些方面的优势使其具有极强的可操作性，成为近年来国外新兴的遗传学、方法学研究和应用热点。