词条 | 单克隆抗体技术 |
释义 | 单克隆抗体技术 § 内容 monoclonal antibody technology 20世纪后期免疫学技术的重大突破,应用B细胞杂交瘤技术产生单克隆抗体(McAb)。 B细胞杂交瘤是免疫的小鼠脾细胞 (B淋巴细胞)与小鼠骨髓瘤(一种浆细胞瘤,浆细胞是B淋巴细胞系的终末形式)细胞融合而成的杂交细胞,其核内含有双亲细胞的染色体,继承了亲代细胞的特征,它既具有瘤细胞在体外培养中迅速增殖的能力,又具备免疫脾细胞合成和分泌特异性抗体的特性。B细胞杂交瘤经过单个细胞培养,可繁殖成为一个细胞系(称为克隆或克隆系),这个过程称为克隆化,而由一个克隆系产生的抗体称单克隆抗体。这种抗体只能特异地与抗原分子上的一个抗原决定簇结合反应,抗体成分均一,抗体的结构、氨基酸顺序、特异性等都是一致的,且在培养过程中只要不发生变异,不同时间内分泌的抗体都能保持同样的结构和功能。因此,用这种技术可按人们的意愿生产大量很纯的单克隆抗体,这些都是用普通血清学方法所不能达到的。这技术在医学和生物学各个领域中得到广泛应用,并为临床疾病的诊断、治疗提供了新手段。单克隆抗体与普通抗血清抗体的区别见图。带有多个抗原决定簇的抗原分子注入动物体内,被带有相应抗原决定簇受体的淋巴细胞所识别,它们活化、增殖,每一个 B细胞系分别分泌针对单个抗原决定簇的抗体分子。普通抗血清是含有这些抗体的混合物。而将免疫小鼠的淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,经过克隆化,所产生的抗体是高度纯一的单克隆抗体。 单克隆抗体的提纯 一般常用金黄色葡萄球菌蛋白A-琼脂糖4B亲和层析法。 单克隆抗体的保存 由腹水中获得的抗体,经离心去除细胞成分,再经冷冻超速离心,取上清液加0.1%NaN3,少量分装,冷冻于-70℃可保存几年。 但应避免反复冻融,否则抗体失活,特别是IgM抗体。提纯的单克隆抗体,冷冻干燥保存于2~8℃,取出时溶解后,保存于2~8℃,至少一个月内可保持稳定。腹水抗体也可冷冻干燥低温(4℃)保存两年,融化后放置4℃下保存一个月。短期使用的腹水抗体,4℃3~4 个月仍保持稳定, 培养上清加0.1%NaN3,贮于-20℃,两年不失活性。 单克隆抗体在临床上的应用 单克隆抗体用于临床诊断和治疗,目前研究较多的是抗人 T细胞单克隆抗体,用以识别人T细胞表面的不同抗原决定簇,有OKT系统及Leu系统。T细胞,特别是免疫调节T细胞(Ti/h及Tc/s细胞)对于调控免疫应答和维持免疫自稳起着至关重要的作用,临床上许多疾病的发生与免疫调节失常有关,因此,研究 T细胞在这些疾病中的变化,有助于探讨病因和辅助诊断。各种免疫缺损病、肿瘤或感染性疾病都与免疫功能低下有关,而变态反应性疾病、自身免疫性疾病等与免疫功能亢进有关。因此应用 OKT系列单克隆抗体检测这些疾病患者外周血中T细胞亚群及T4/T8比值的变化,对探讨发病机理,及时诊断疾病及监测病情发展有十分重要的意义。接受肾移植或骨髓移植的患者往往需应用各种免疫抑制剂以控制排斥反应, T细胞亚群的检测有助于了解移植器官的排异和发展。 抗人 T细胞单克隆抗体可用以治疗白血病、移植物抗宿主反应(GVHD)和急性肾排斥等,目前尚处于摸索阶段。 § 配图 单克隆抗体技术 § pray_wq 单克隆抗体在临床上的应用 单克隆抗体用于临床诊断和治疗,目前研究较多的是抗人 T细胞单克隆抗体,用以识别人T细胞表面的不同抗原决定簇,有OKT系统及Leu系统。T细胞,特别是免疫调节T细胞(Ti/h及Tc/s细胞)对于调控免疫应答和维持免疫自稳起着至关重要的作用,临床上许多疾病的发生与免疫调节失常有关,因此,研究 T细胞在这些疾病中的变化,有助于探讨病因和辅助诊断。各种免疫缺损病、肿瘤或感染性疾病都与免疫功能低下有关,而变态反应性疾病、自身免疫性疾病等与免疫功能亢进有关。因此应用 OKT系列单克隆抗体检测这些疾病患者外周血中T细胞亚群及T4/T8比值的变化,对探讨发病机理,及时诊断疾病及监测病情发展有十分重要的意义。接受肾移植或骨髓移植的患者往往需应用各种免疫抑制剂以控制排斥反应, T细胞亚群的检测有助于了解移植器官的排异和发展。抗人T细胞单克隆抗体可用以治疗白血病、移植物抗宿主反应(GVHD)和急性肾排斥等,目前尚处于摸索阶段。 § § 所属分类 基础方法 现代医学 |
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