达·芬奇创作《蒙娜丽莎》时画的草稿图样。由意大利裔流亡富商巴托洛米欧·尤斯塔皮奥于1956年捐献给巴黎卢浮宫。尤斯塔皮奥家族几代人热衷艺术品收藏，1955年他病逝，遗嘱要求将毕生收藏的部分重要艺术品捐赠法国巴黎卢浮宫，其中就包括《蒙娜丽莎》草图。

2001年借助先进的X光分析技术，《蒙娜丽莎》草图绘画颜料显示作品约绘于1504年前后。

草图的用笔痕迹明显表明为左撇子用笔习惯，画作左上角为达·芬奇的签名，经鉴定决非仿制，符合达·芬奇的签名习惯。左下角为第一任收藏人安吉罗·鲁菲尼的印章，达·芬奇的多幅创作草图，以及素描作品均有安吉罗·鲁菲尼的收藏印章。草图用笔大胆奔放，颜料厚重，效果强烈，是达·芬奇少有的作品风格，造型却不失严谨，构图基本与《蒙娜丽莎》原作无二，只是背景略有不同，可以断定作品仅在一小时之内即完成。