词条 | PCR 边缘效应 |
释义 | 用大胶槽跑电泳时,出现胶块(或泳道)的边缘溴酚蓝比胶块中间的跑得快的现象。 根据本人跑胶的经验,我觉得出现这种问题可能原因有: 1、制胶的梳子用久了已出现变型,使得加样孔不处于同一平行,那么跑胶时溴酚蓝就会出现不一样快。 2、制胶后加电泳缓冲液时,注意不能让缓冲液跑到胶底下,根据我以往的经验,液体最容易跑到胶的底下两侧,使胶的边缘与中间跑胶速度不一样。 3、可能电泳仪出现了问题,不过这种可能比较小,建议使用其他电泳仪试一试。 4、溶胶的时间长一些,但是不能太长,以免胶被烧干了。溶胶如果不能混匀的话,那么的话就很有可能出现边缘效应。 5、电泳槽中的缓冲液最好超过胶1CM左右,否则缓冲液像中间泳,两边的电泳缓冲液就不均匀了。 6、溴酚兰的量不要超过样品的5分之一,溴酚兰过量后跑的速度不一致 7、建议你MAKER跑中间的空,尽量不要点边缘的孔。 8、晾胶时一定使其自然冷却,不要冷却的不均匀,会出现月牙型的图形 |
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