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词条 PCR 边缘效应
释义

用大胶槽跑电泳时,出现胶块(或泳道)的边缘溴酚蓝比胶块中间的跑得快的现象。

根据本人跑胶的经验,我觉得出现这种问题可能原因有:

1、制胶的梳子用久了已出现变型,使得加样孔不处于同一平行,那么跑胶时溴酚蓝就会出现不一样快。

2、制胶后加电泳缓冲液时,注意不能让缓冲液跑到胶底下,根据我以往的经验,液体最容易跑到胶的底下两侧,使胶的边缘与中间跑胶速度不一样。

3、可能电泳仪出现了问题,不过这种可能比较小,建议使用其他电泳仪试一试。

4、溶胶的时间长一些,但是不能太长,以免胶被烧干了。溶胶如果不能混匀的话,那么的话就很有可能出现边缘效应。

5、电泳槽中的缓冲液最好超过胶1CM左右,否则缓冲液像中间泳,两边的电泳缓冲液就不均匀了。

6、溴酚兰的量不要超过样品的5分之一,溴酚兰过量后跑的速度不一致

7、建议你MAKER跑中间的空,尽量不要点边缘的孔。

8、晾胶时一定使其自然冷却,不要冷却的不均匀,会出现月牙型的图形

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更新时间:2024/12/23 11:37:07