拉丁名

形态特征

经济用途

培养方法、分析方法

参考文献

拉丁名

Alcaligenes eutrophus

形态特征

【待完善】

经济用途

随着上世纪塑料工业的发展，人们的衣食住行已直接或间接地和塑料联系在一起了，塑料为人类的发展作出了巨大贡献。但是，由于塑料的不可降解性，其给人类生存环境带来的危害也越来越大。为解决这一问题，国内外科学家相继开展了生物可降解塑料的研究与开发。

利用微生物生产的生物降解塑料：聚-β-羟基丁酸(Poly-β-hydroxybutyrate,PHB)、聚-β-羟基丁酸-co-β-羟基戊酸共聚物(Poly-β-hydroxybutyrate-co-β-hydroxyvalerate,PHBV)成了这类研究中的一个热门。研究表明，PHB、PHBV具有很好的热可塑性，其抗冲击强度，延展性和热稳定性均可和化学塑料相媲美，甚至更优。PHB、PHBV是细菌细胞内的储存物质，它作为细胞内碳源和能量参与细胞的物质代谢。PHB、PHBV被微生物彻底分解后，其最终产物是二氧化碳和水，对环境无任何危害。

研究表明，真养产碱杆菌(Alcaligenes eutrophus)是一种优良的积累PHB、PHBV的细菌。因而真养产碱杆菌被应用于发酵法生产PHB、PHBV

培养方法、分析方法

1.1　培养基和培养方式

1)基础培养基(g/L)　果糖20g(单独灭菌)；磷酸氢二钠4g；硫酸镁0.4g；硫酸铵1.5g；磷酸二氢钾1.3g；微量元素溶液1ml/L；蒸馏水1L；pH7.0；115℃灭菌20min。

2)微量元素溶液(g/L)　FeSO4·7H2O　10g；ZnSO4·7H2O　2．25g;CuSO4·5H2O　1g;MnSO4·5H2O　0.5g;CaCl2·2H2O　2g;Na2B4O4·10H2O　0.23g;(NH4)6Mo7O24　0.1g;35%HCl　10ml。

3)斜面培养基(g/L)　酵母浸膏10g；蛋白胨10g；牛肉膏5g；氯化钠3g；琼脂20g；蒸馏水1000ml，pH7.0，115℃灭菌20min。

4)选择培养基(g/L)　葡萄糖10g；(NH4)2SO4　0.75g；Na2HPO4·12H2O　2g；KH2PO4　0.65g；MgSO4　0.2g；微量元素溶液0.5ml；蒸馏水1000ml；pH7.0；115℃灭菌20min。

5)斜面培养　恒温培养箱中，30℃，培养48h。用于菌种传代及保藏。

6)摇瓶培养　250ml三角瓶，装入20ml培养基，接种后置旋转式摇床上，200r/min，30℃，振荡培养48h。

7)平皿培养　直径9cm的平皿，装入20ml选择培养基，恒温培养箱中，30℃，培养48h。用于突变株的筛选。

1.2　分析方法

1)生长量　(1)菌体浓度：将发酵液适当稀释后，于620nm处测O.D值。(2)菌体干重：取发酵液10ml，离心收集菌体，经水洗2次后，于80℃干燥至恒重后称重。

2)氨态氮的测定　甲醛法。

3)还原糖的测定　3，5－二硝基水杨酸法。

4)PHB的测定　(1)气相色谱法。(2)硫酸色谱法。

参考文献

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〔5〕陈琦等.利用葡萄糖发酵产聚-β-羟基丁酸菌株的选育.微生物学通报，1994，21(6)：333

〔6〕北京大学生物系生物化学教研室.生物化学试验指导.北京：高等教育出版社，1984

〔7〕G.Braunegg,B.Sonnleither,and R M,Lafferty,European J.Appl.Microbiol.Biotechnol,1978,6,29-37

〔8〕Takahiro Suzuki,Appl.Microbiol Biotechnol,1986,23:322～329

〔9〕Biotechnology and bioengineering,1994.439

〔10〕Sei Kwang hahn.Biotechnology Techniques,1993,7(3):17～21