简介

应用

简介

多核苷酸磷酸化酶

polynucleotide phospho－rylase

S．Ochoa、M．Grunberg－Monago（1955），在棕色固氮菌（Azotobacter vinelandii）中发现的酶，广泛存在于微生物中。催化（NMP）

应用

因为对核苷酸的特异性低，可以用来合成各种多聚物。也可以由大肠杆菌、藤黄微球菌（Micro－coccus luteus）精制出高纯度的酶，分子量均约20万，性质也相同。聚合反应时有作为引物（primer）的寡核苷酸起作用，对于反应速度几乎没有影响。另一方面，逆反应是从RNA或多聚物的3′-OH末端逐级水解的。

多核苷酸磷酸化酶广泛存在于微生物中，催化以核苷二磷酸为底物合成多核苷酸的反应。多核苷酸磷酸化酶不需要DNA为模板。

该酶在生物体内的作用主要是催化RNA分解为核苷二磷酸，而不是起合成RNA的作用。在实验室中，这个酶被用于人工合成多核苷酸。该酶专一性不强，由不同核苷二磷酸做底物，可以合成不同的多核苷酸聚合物。如用ADP做底物，可合成多聚A（PolyA）。

在人工合成多核苷酸时，若用多核苷酸磷酸化酶的粗制品，不需要引物就可以发生反应。若用高纯度的酶制品，则反应进行很慢。如果加入少量多核苷酸或寡核苷酸作引物，可使反应一开始就较快进行。该酶在催化RNA合成时，对所需引物的基本要求是引物至少含有两个核苷酸，3’-端的羟基必须是游离的。