简介

应用

实验

简介

集聚素是由运动神经分泌并可诱导肌纤维的乙酰胆碱酯酶和乙酰胆碱受体发生聚集。

应用

确定化合物是否是神经蛋白酶抑制剂的方法，其特征在于，将化合物与神经蛋白酶、其变体或包含蛋白酶结构域的片段以及包含集聚素、其变体或含有集聚素口－或口－切割位点的片段的蛋白质或多肽在水缓冲溶液中共同培养，并且测量集聚素的切割量。本发明还涉及通过这种方法发现的神经蛋白酶抑制剂，尤其是式（１）化合物，其中Ｈａｌ↑［１］和Ｈａｌ↑［２］是氟、氯或溴，以及该抑制剂在治疗和／或预防突触缺乏引起的疾病例如骨骼肌萎缩、精神分裂症和认知障碍中的应用。

实验

研究在神经突触形成中发挥重要作用的集聚蛋白（agrin）是否在淋巴细胞中表达并影响淋巴细胞的活化和免疫突触的形成。方法应用RT-PCR检测集聚蛋白在静止和活化淋巴细胞中的表达，并应用实时定量PCR检测分析集聚蛋白的表达量与淋巴细胞活化之间的关系；用抗集聚蛋白抗体观察其对淋巴细胞增殖和免疫突触形成的影响；应用共聚焦显微镜观察集聚蛋白是否参与免疫突触的形成。结果RT-PCR结果显示集聚蛋白在静止和活化的淋巴细胞中均有表达，且经过实时定量PCR分析发现，集聚蛋白的表达和淋巴细胞的活化密切相关；当集聚蛋白被阻断后淋巴细胞的增殖被显著抑制；经共聚焦显微镜观察发现，集聚蛋白在活化的淋巴细胞中以帽化结构形式存在，且和CD3分子共定位，抗集聚蛋白抗体町以明显减少这种帽化结构的形成。结论在神经突触中发挥重要作用的集聚蛋白同样存在于淋巴细胞，呵能通过影响淋巴细胞的免疫突触的形成参与淋巴细胞的活化。