双缩脲（NH2-CO-NH-CO-NH2）是两个分子脲（即尿素）经180℃左右加热，放出一个分子氨（NH3）后得到的产物。双缩脲试剂用于通过双缩脲反应检测双缩脲，因蛋白质中也有-CONH-基也可用于检验蛋白质，与蛋白质接触后的颜色呈紫色。

鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂（NaOH+CuSO4），发生的是双缩脲反应。双缩脲反应实质是在碱性环境下的Cu2+与双缩脲发生的紫色反应。而蛋白质分子中含有很多与双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）结构相似的肽键，所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生颜色反应，可以用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在。

双缩脲试剂中溶液NaOH（双缩脲试剂A）的浓度为0.1g/ml，溶液CuSO4（双缩脲试剂B）的浓度为0.01g/ml。

双缩脲试剂使用时，先加入NaOH溶液（2mL），振荡摇匀，造成碱性的反应环境，然后再加入3~4滴CuSO4溶液，振荡摇匀后观察现象。(不加热）