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词条 PEG融合法
释义

PEG有不同聚合度产物,其相对分子质量分别有1000/2000/4000/6000/12000及20000等,相对分子质量为1000~6000的PEG均可用作促融剂。PEG的作用机理尚不清楚,有人认为,PEG可以使原生质体的膜电位降低,然后,原生质通过钙离子交联促进凝聚。另外,由于PEG的脱水作用,扰乱了分散在原生质膜表面的蛋白质和脂质的排列,提高了脂质颗粒的流动性,从而促进原生质体融合。PEG还可能导致细胞脱水凝聚二收缩变形,使邻近细胞大面积紧密接触,使该部分的膜间蛋白颗粒发生转移和凝聚,邻近的纸质分子发生相互作用,由于钙离子等强烈的促进脂质分子的扰动和重新组合,使接触处的小区域发生融合,形成小的细胞质桥,并不断扩大而导致两个细胞融合。PEG对细胞有一定的毒性作用,相对分子质量越大,毒性越强,在使用前应测试PEG对细胞毒性作用及使用条件,包括使用时PEG的实际浓度、作用时间及反应温度等主要因素。在植物原生质体融合中,习惯用高钙、高pH溶液,他能获得较高的融合频率。

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更新时间:2024/11/15 18:32:09