词条 | 化学免疫学 |
释义 | 化学免疫学immunochemistry 以抗体的结构,抗原抗体反应的物理化学分析,补体的结构和作用,各种抗原的化学分析,以及参与免疫的分子的结构和机能为研究对象的科学 相关介绍免疫组织化学免疫组织化学简称免疫组化,是应用免疫学及组织化学原理,对组织切片或细胞标本中的某些化学成分,进行原位的定性、定位或定量的研究。这种技术称为免疫组织化学技术。免疫组化是利用抗体与抗原的结合具有高度特异性的特点,采用已知的抗体检测组织或细胞的抗原物质,以期确定组织或细胞是否存在未知抗原,并进行定性、定位或定量的研究。抗体与抗原结合后形成的免疫复合物是无色的,故必须借 【作者单位】:中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院【分类号】:R446.6 【DOI】:cnki:ISSN:1672-1535.0.2004-03-021 免疫组织化学简称免疫组化,是应用免疫学及组织化学原理,对组织切片或细胞标本中的某些化学成分,进行原位的定性、定位或定量的研究。这种技术称为免疫组织化学技术。免疫组化是利用抗体与抗原的结合具有高度特异性的特点,采用已知的抗体检测组织或细胞的抗原物质,以期确定组织或细胞是否存在未知抗原,并进行定性、定位或定量的研究。抗体与抗原结合后形成的免疫复合物是无色的,故必须借助组织化学方法,将抗体抗原反应部位显示出来。现在已知,组织或细胞凡是含有诸如蛋白质,多肤,多糖、磷脂、受体、酶、激素、核酸、氨基酸及病原体等抗原物… 免疫细胞化学(immunocytochemistry) 是将免疫学基本原理与细胞化学技术相结合所建立起来的新技术,根据抗原与抗体特异性结合的特点,检测细胞内某种多肽、蛋白质及膜表面抗原和受体等大分子物质的存在与分布。肽类与蛋白质种类繁多,均具有抗原性,当将人或动物的某种肽或蛋白质作为抗原注入另一种动物体内,则产生与该抗原相应的特异性抗体(免疫球蛋白);将抗体从血清中提出后,结合上某种标记物,即成为标记抗体。用标记抗体与组织切片标本孵育,抗体则与细胞中相应抗原发生特异性结合,结合部位被标记物显示,则在显微镜下观察到该肽或蛋白质的分布。用荧光素(常用异硫氰酸)标记抗体,并于荧光显微镜下观察,称免疫荧光术。如抗体与辣根过氧化物酶(horseradishperoxidase,HRP)等结合,进行酶显示后,可在光镜或电镜观察,用于电镜者则称为免疫电镜术(immunoelectronmicroscopy)此外,以铁蛋 标记抗体白标记抗体,称铁蛋白标记法,也能用于电镜下观察。 标记抗体与抗原结合方式主要有两种:①直接法:用标记抗体与抗体中的相应抗原直接结合,操作方法简便,特异性高,但敏感性较差,此法可用于检定未知抗原;②间接法:先用未标记的具有特异性的第一抗体与样品中的相应抗原结合,然后再以标记的第二抗体与特异性的第一抗体结合;第二抗体是用第一抗体作为抗原注入另一动物体内诱导产生的抗体,然后再结合以标记物。通过这样的放大作用,使抗原分子上的标记物大大增多,故间接法较直接法的敏感性大为增高,约高5~10倍,故应用更为广泛。间接法中较常用的,如过氧化物酶-抗过氧化物酶复合物法(peroxidaseanti-peroxidasecomplexmethod, 标记方法PAP法),该法除需一抗和二抗外,还需要制备HRP标记的抗酶抗体,即以HRP作为抗原免疫动物,制成抗HRP抗体,再以HRP对标记该抗体,制成稳定的环形PAP复合物。标本先后经一抗、二抗和PAP复合物处理后再以DAB显色抗原存在部位可见棕黄色产物。 免疫细胞学技术的发展近10年来,免疫细胞学技术有了很大进展,各种新方法相继建立。单克隆抗体(monoclonalantibody)制备技术极大地提高抗体的特异性与免疫组化染色的精确性。继PAP法之后由于生物素-亲合素等试剂的应用,为检测微量抗原、受体、抗体提供了更精确的技术。目前常用的生物素-亲合方法有:标记亲合素-生物素法(labelledavidin-biotinmethodLAB法)、桥连亲合素-生物素法(bridgedavidin-biotinmethod,BAB法)及亲素-生物素-过氧化物酶复合物法(avidin-biotin-peroxidasecomplexmethod,ABC法);现市上有配制成的ABC药盒供应,使用简便,是目前广泛应用的一种方法。 |
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