一、原理

二、福林试剂的配制

三、测定方法

一、原理

蛋白质或多肽分子中有带酚基酪氨酸或色氨酸，在碱性条件下，可使酚试剂中的磷钼酸化合物还原成蓝色（生成钼蓝和钨蓝化合物）。蓝色的深浅与蛋白质的含量成正比， 可用比色法测定。

二、福林试剂的配制

于2000ml磨口回流装置内加入钨酸钠（Na2WO4·2H2O）100g，钼酸钠（NaMoO4·2H2O）25g。水700ml，85％的磷酸50ml，浓盐酸100ml，文火回流10h，加入硫酸锂（Li2SO4）150g，蒸馏水50ml，混匀取去冷凝器，加入几滴液体溴，再蒸沸15min，以驱逐残溴及除去颜色，溶液应呈黄色。若溶液有绿色，需再加数滴液溴，再蒸沸除去，冷却后定容至1000ml，过滤，置于棕色瓶中保存，此溶液使用时加2倍蒸馏水稀释。

三、测定方法

将1ml标准蛋白溶液和5ml0.025mol/lPH7.5的磷酸缓冲液加入试管中，在40℃保温10min，迅速加入1ml酶液，保温15min后加入3ml10%的三氯乙酸中止反应。取滤液1ml加入0.55M的碳酸钠溶液5ml和福林试剂0.5ml，40℃水浴10min显色，在OD680处比色。