简介(染色原理)

流程

注意事项

简介

台盼蓝拒染法是利用台盼蓝只能将死细胞染成蓝色而活细胞不能被染上的方法检测细胞存活率的一种快速简便的方法。

染色原理

正常细胞具有完整的细胞膜结构，而死亡的细胞其细胞膜结构被破坏。台盼蓝无法通过正常的细胞膜因而正常的细胞不被台盼蓝染上，而死细胞则可被台盼蓝染成蓝色。

流程

（1）将对数生长期的细胞浓度调整为1~10×10细胞/ml，按10~10个细胞接种于96孔板，每孔100 μl；

（2）培养细胞24小时后，对其进行不同处理，每个处理设三个平行对照；

（3）收集细胞，经台盼蓝染色，在倒置显微镜下计数蓝染及不染色细胞，计算细胞存活率；

（4）结果统计：

镜下观察，死细胞被染成淡蓝色，而活细胞拒染。

根据下式求细胞活力：

活细胞率（%）= 活细胞总数/（活细胞总数+死细胞总数）×100

注意事项

台盼蓝染细胞时，时间不宜过长。否则，部分活细胞也会着色，会干扰计数。