词条 | 尿液蛋白质定量检测 |
释义 | 尿液蛋白质定量检测正常人尿液中含有微量的蛋白质,每天排出量在150mg 以下,其中以白蛋白占多数,随不同病种有一定量的球蛋白和其它蛋白。随着肾病科研工作的开展,以观察患者每天排出蛋白质的量以示病情的变化,因此尿液蛋白质定量在临床上有实际应用价值,已成为医院化验室常规的检验项目。 尿液蛋白质定量检测方法丽春红-S法 尿液标本中的蛋白质与丽春红-S染料混匀后一起被三氯醋酸沉淀,将沉淀物溶解于碱性溶液中,此时溶液呈紫色,显色深度与蛋白质浓度成正比。 试剂 三氯乙酸-丽春红-S试剂原液:称取丽春红-S 1.0 g,加入到1 000 ml 300 g/L三氯乙酸中溶解。 三氯乙酸-丽春红-S试剂应用液:将原液用蒸馏水按1:10稀释,放置室温稳定数月。 蛋白定性试剂。0.2 mol/L氢氧化钠溶液。 蛋白标准曲线:把定值蛋白稀释成不同的浓度,按操作测定其吸光度,以吸光度为横坐标,以稀释后的蛋白浓度为纵坐标绘制标准曲线。 双缩脲比色法 以磷钨酸乙醇溶液沉淀尿中的蛋白质,在碱性介质中蛋白质与铜离子形成紫红色络合物,与标准液比色即可得出尿中蛋白质的含量。 尿液蛋白质定量检测操作先做尿蛋白定性试验,以适当稀释标本。在试管中加入100μl标本,再加入1 ml三氯乙酸一丽春红-S应用液,混匀后以3 000 r/min离心15分钟,吸去上清液,倒置于洁净滤纸上。在沉淀中加入0.2 mol/L氢氧化钠溶液l ml,用560 nm波长测定其吸光度,查标准曲线的蛋白含量。 尿液蛋白质定量测定参考值46.5±18.1 mg/L 尿液蛋白质定量检测注意事项尿液如被稀释应乘以稀释倍数。尿中血红蛋白含量>5 mg/L时影响结果。离心后上清必须全部弃去,若沉淀中夹带有丽春红-S影响比色结果。 尿液蛋白质定量检测试剂蛋白沉淀液:称取磷钨酸7.5 g,加入30 ml蒸馏水、95%乙醇385 ml、浓盐酸25 ml。 双缩脲液:(1)称取枸橼酸钠34.6 g,无水碳酸钠20 g,加入120 ml蒸馏水使其溶解;(2)称取硫酸铜3.46 g,加入20 ml蒸馏水使其溶解。将(1)、(2)混合,加入蒸馏水至200 ml,备用。0.75 mol/L氢氧化钠溶液。蛋白标准液(1.5 g/L):称取150 mg结晶型冻干人血清白蛋白,加入100 ml的3 g/L苯甲酸溶液溶解。 |
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