一、冷藏蚀刻技术发展

二、冷藏蚀刻技术操作方法

一、冷藏蚀刻技术发展

冷藏蚀刻（freeze－etching）技术是在冷藏断裂技术的基础上发展起来的更复杂的复型技术。如果将冷藏断裂的样品的温度稍微升高，让样品中的干冰在真空中升华，而在表面上浮雕出细胞膜的超微结构。当大量的干冰升华之后，对浮雕表面进行铂一碳复型，并在腐蚀性溶液中除去生物材料，复型经重蒸水多次清洗后，捞在载网上作电镜观察。

二、冷藏蚀刻技术操作方法

1.冷藏断裂是在冷藏条件下使样品变得又硬又脆，用刀劈裂样品，暴露观察面。因为是用刀劈裂的样品，断裂往往发生在细胞被冻结后较脆弱的部位，多数是沿细胞及细胞器的膜裂开。由于断裂面是凸凹不平的，所以图像立体感强。冷藏断裂时，刀的作用在于劈裂，而不是切割，所以刀刃不必锋利，但不能有缺口、油污和水份，还需保持清洁干燥。冷藏复型的断裂操作要在真空中进行，是因为真空对热传导性差，能使样品较长时间维持在较恒定温度下进行断裂操作，同时也便于进行下步的蚀刻处理。

2.预处理取新鲜组织块，大小为1?5～3～5mm，用2?5%戊二醛固定1～3小时。为防止冰晶形成，用30%甘油生理盐水浸泡8～12小时。