拼音

1 范围

2 方法提要

3 试剂与材料

4 仪器

5 分析步骤

6 测定

拼音

huàzhuāngpǐnzhōng4-ānjīliánběnjíqíyándejiǎncèfāngfǎ

《化妆品中4-氨基联苯及其盐的检测方法》由国家食品药品监督管理局于2012年1月18日国食药监保化[2012]13号发布。

1 范围

本方法规定了化妆品中4-氨基联苯及其盐的液相色谱/串联质谱测定方法。

本方法适用于化妆品中4-氨基联苯及其盐的测定，其检测限为1.0μg/kg，定量限为3.3μg/kg。

2 方法提要

样品中禁用芳香胺4-氨基联苯及其盐，通过超声提取，液液萃取及固相萃取小柱净化并浓缩后，用适当的有机溶剂定容，经液相色谱/串联质谱测定，以内标法定量。

3 试剂与材料

3.1甲醇：色谱纯。

3.2乙腈：色谱纯。

3.3甲酸：色谱纯。

3.4正己烷：分析纯。

3.5乙醚：分析纯。

3.6氯化钠饱和溶液。

3.7HLB固相萃取小柱或相当者：500mg/6mL。

3.830%甲醇水溶液：甲醇（3.1）+水=30+70。

3.9氨水：NH3含量25%～28%。

3.105%氨水甲醇溶液：氨水（3.9）+甲醇=5+95，现配现用。

3.114-氨基联苯：CAS92-67-1，纯度>99%。

3.124-氨基联苯-D9：CAS344298-96-0，纯度>99%。

3.134-氨基联苯标准贮备液（1000μg/mL）：准确称取标准物质10.0mg，用甲醇溶解,稀释，定容至10mL，于-18℃下保存。

3.144-氨基联苯标准工作溶液：分别取（3.13）标准贮备液，用甲醇稀释定容，制成浓度为1000ng/mL的标准溶液，于-18℃下保存。临用时用50%甲醇水溶液稀释成500ng/mL、250ng/mL、125ng/mL、50ng/mL、25ng/mL、5ng/mL。

3.154-氨基联苯-D9内标标准溶液：用50%甲醇稀释内标标准品溶液，得到100ng/mL4-氨基联苯-D9内标溶液。

3.16分别从4-氨基联苯标准工作溶液（3.14）中分别吸取0.5mL溶液与0.5mL100ng/mL内标溶液（3.15）混合，制得内标4-氨基联苯-D9浓度为50ng/mL，4-氨基联苯分别为250ng/mL、125ng/mL、62.5ng/mL、25ng/mL、12.5ng/mL、2.5ng/mL的标准溶液。并根据需要配制成相应浓度的空白基质加标标准溶液。

4 仪器

4.1液相色谱-串联质谱检测器（配ESI离子源）。

4.2分析天平：感量0.1mg。

4.3涡旋混合器。

4.4离心机：转速10000r/min,容量为10mL。

4.5样品过滤器：0.2μmPTFE滤膜或相当者。

5 分析步骤

5.1化妆水、面霜、粉底类化妆品

称取样品0.2g（精确到0.001g），置于10mL具塞塑料离心管中，加入1mL浓度为100ng/mL氘同位素标记的4-氨基联苯（3.15）,再加入3mL氯化钠饱和溶液（3.6），于涡旋混合器上使样品分散，加入3mL乙腈（3.2），充分涡旋，并超声提取30min，10000r/min离心10min，吸出上层清液于另一10mL具塞塑料离心管中，下层氯化钠饱和溶液用3mL乙腈（3.2）重复提取步骤一次，合并两次乙腈提取液，往提取液中加入正己烷（3.4）2mL，涡旋离心，静置分层，弃去上层正己烷溶液，再在乙腈层加入正己烷（3.4）2mL，涡旋离心，静置分层，弃去上层正己烷溶液，转移下层乙腈溶液至另一10mL玻璃刻度试管中，40℃水浴下用氮气吹至近干，并用30%甲醇水溶液（3.8）重新溶解、定容至2mL，并经0.2μm滤膜过滤后作为测定液上机测定。

5.2洗面奶、沐浴液类化妆品

称取样品0.2g（精确到0.001g），置于10mL具塞塑料离心管中，加入1mL浓度为100ng/mL氘同位素标记的4-氨基联苯（3.15）,再加入3mL氯化钠饱和溶液（3.6），于涡旋混合器上使样品分散，加入3mL乙醚（3.5），充分涡旋，并超声提取30min，10000r/min离心10min，吸出上层清液于另一10mL具塞塑料离心管中，下层氯化钠饱和溶液用3mL乙醚（3.5）重复提取步骤一次，合并两次乙醚提取液，用氮气吹至近干，并用30%甲醇水溶液（3.8）2mL重新溶解，再加入8mL纯水稀释。

HLB固相萃取小柱（3.7），接上固相萃取装置，小柱预先用10mL甲醇、10mL水进行活化、平衡。将待净化的样品溶液倾倒入固相萃取小柱，待样品溶液自然流尽后，依次用10mL纯水、5mL10%甲醇溶液淋洗小柱；待淋洗液自然流尽后，用吸球吹出小柱中的残留液，用10mL5%氨水甲醇溶液（3.10）洗脱固相萃取小柱，收集洗脱液，40℃水浴下经氮气吹至近干，用30%甲醇水溶液（3.8）重新溶解、定容至2mL，并经0.2μm滤膜过滤后作为测定液上机测定。

5.3指甲油与口红类化妆品

称取样品0.2g（精确到0.001g），置于10mL具塞塑料离心管中，加入1mL浓度为100ng/mL氘同位素标记的4-氨基联苯（3.15）,再加入3mL乙腈（3.2），于涡旋混合器上使样品分散溶解，充分涡旋，并超声提取30min，10000r/min离心10min，取上层清液于另一10mL具塞塑料离心管中，下层样品残渣再用3mL乙腈（3.2）重复提取步骤一次，合并两次乙腈提取液，往提取液中加入正己烷（3.4）2mL，涡旋离心，静置分层，弃去上层正己烷溶液，再在乙腈层加入正己烷2mL，涡旋离心，静置分层，弃去上层正己烷溶液，转移下层乙腈溶液至另一10mL玻璃刻度试管中，40℃水浴下用氮气吹至近干，并用30%甲醇水溶液重新溶解、定容至2mL，并经0.2μm滤膜过滤后作为测定液上机测定。

6 测定

6.1液相色谱参考条件

以下为液相色谱参考条件：

a）色谱柱：C18，1.7μm，100mmí2.1mm（内径），或相当者

b）柱温：40℃；

c）流动相：0.3%甲酸水溶液+乙腈=75+25

d）洗脱程序：等度；

e）流速：0.5mL/min；

f）进样量：2μL；

6.2质谱参考条件

以下为质谱参考条件：

a）电离源模式：电喷雾离子化；

b）电离源极性：正离子模式；

c）雾化气：氮气；

d）雾化气压力：45psi；

e）毛细管电压：3500V；

f）干燥气温度：325℃；

g）干燥气流速：5L/min；

h）鞘气温度：400℃；

i）鞘气流速：12L/min；

j）监测方法：多反应监测（MRM）；

k）分辨率：Q1（unit）Q3（unit）。