词条 | 非洲木薯花叶病毒 |
释义 | 基本信息学名 African cassava mosaec virus,简称ACMV异名 木薯潜隐病毒,木薯花叶病毒 英文名 African cassava mosaic virus 分类地位 属联体病毒组(Bigemimivirus-group)。 分布 遍布非洲、马达加斯、印度洋诸岛(塞舌尔、桑给巴尔、Femba)、印度、斯里兰卡和爪哇。 寄主ACMV侵染包括木薯(Manibot esculenta Crantz)在内的木薯的7个种和大戟科植物(Jatropha multifid L.)、Laportea aestuans和Hewittia sublobata也被怀疑是ACMV在肯尼亚和西非的自然寄主,但再将这两种植物上的病毒回接到木薯上却没有成功。ACMV可经汁液传播到烟和曼陀罗上,Licotiana bentnamiana是最好的繁殖寄主,Datura stramonium可用作枯斑寄主。 生物学特性开始出现是在叶片上显现出褪绿的小斑,然后逐步扩大并和周围的正常绿色组织混成一片,最后形成典型的花叶,有时在受侵染叶子背面还可以观察到突起。症状的严重程度随季节和栽培品种的不同而不同,在潮湿、凉爽的雨季(10~11月)症状表现得严重,而在夏季(2~4月)通常隐症或只见到很淡的花叶。 病毒粒体呈双生(30×20nm),在长轴的中线上有1明显的"腰",每一半都为一明显的五角形。另外,提纯液中也可含有半球状颗粒,直径约20nm,三联体也偶有发现。 ACMV含单链环状DNA,约占粒体重的22%,分子量0.92×106。核苷酸序列表现有两个基因组份,分别含2779个核苷酸(DNA-1)和2774个核苷酸(DNA-2)。典型株系的半球状粒体中含一较小的环状DNA,分子量为0.4×106。除此之外,病毒DNA提纯液中还含有线状分子,它与DNA-1和DNA-2有相同的核苷酸序列,分子量为0.8×106。DNA-1和DNA-2是病毒侵染所必须的,DNA-2的基因产物可能与病毒系统侵染有关,DNA-1病毒侵染扩散过程中起某种作用,并决定着蛋白质的特异性和在烟草上的症状。用DNA-1单独接种Nicotiana berth-amiana后,可在茎、叶、根中发现病毒DNA,但其数量只有用DNA-1和 DNA-2共同接种后植物体内病毒DNA量的5%。DNA-2对病毒组装不是必须的。 ACMV粒体含单一蛋白,占粒体重的78%。分子量早期估计为34000,现在证实为31800±700,蛋白质中不含碳水化合物。粒体在缓冲液(0.01M,pH8.0的 Tris-HCL,含0.005M乙二胺四乙酸钠)中稳定,但在pH8.0,0.03%十二烷基磺酸钠中分解,估计它们是靠蛋白?核酸连接来保持稳定的。沉降系数S20,W=76S(主要组分)和50S(较小组分)。粒体分子量4.24×106,A260/280为1.4。该病毒具有中等免疫原性。用典型株系接种克里夫兰烟(N.clevelan-dii),其汁液致死温度约55℃,稀释限点10-3,室温2~3天后侵染力降低,至3~4天后消失,冻干叶片或冰冻叶片可保持侵染力至少6个月。在冰冻、4℃或重复冻融的情况下,提纯的ACMV可保持侵染性和血清学活性145天以上,但在50%熏蒸甘油中只能保持不超过40天。 病毒株系主要根据血清学和在寄主上的反应,分为典型株系、肯尼亚海岸株系、印度株系和安哥拉缺陷株系。1986年,Harrison等人根据血清学和DNA杂交的结果,又对非洲不同地区以及印度的ACMV进行了划分,共分为三组,A组包括安哥拉、科特迪瓦、尼日利亚、刚果、肯尼亚西部的分离物和不能形成病毒粒体的缺陷株系,B组包括来自肯尼亚海岸、马达加斯加和马拉维的分离物;C组为印度和斯里兰卡的株系。其中C组株系与其他的ACMV相差较多,所以现在称为印度木薯花叶病毒(Indian cassa a mosaic virus-ICMV)。 传播途径ACMV可通过多种途径传播,如嫁接、汁液接种、种薯及昆虫介体等,但汁液接种难传,种子和菟丝子不能传播。昆虫介体白飞虱(Bemiisa tabaci)以持久方式传播,最短获毒时间为3.5小时,最短潜隐时间为8小时,最短接种时间为10分钟,它可保持侵染能力9天,大约10%的传播能由单头成虫完成。病毒存在于口器中,但不能通过卵传给下一代。在肯尼亚,B.tabaci的传播主要是短距离的。 检验方法病状观察、鉴别寄主反应、血清学检测试验、核酸杂交、电镜观察和基因扩增实验(PCR)等均能对ACMV进行诊断,现分述如下: 鉴别寄主木薯(Manihot esculenta),通过白飞虱或嫁接接种后3~5周,呈现严重的系统花叶,有症状的枝条上叶片的症状轻重不一或没有症状,轻重取决于病毒的分离物。N.berthamiana接种,叶局部褪绿斑,然后是严重的系统性卷叶,皱缩和黄色斑点,同时叶变小和节间缩短。克里夫兰烟(N.clevelandii)接种8~14天显症,典型株系能导致局部斑,后发展系统卷叶和矮化,最后在一些叶片上出现不规则的粗黄脉带和块。肯尼亚海岸株系难接种成功,或产生轻微的症状或不侵染。曼陀罗(D.stramonium)典型株系,先引起局部褪绿和坏死斑,后系统沿脉变色,严重卷叶和畸形。 血清学检测 琼脂扩散、ELISA、免疫电镜、萤光抗体染色等均成功的应用于对ACMV的检测中,其中以ELISA的应用最为广泛。但值得注意的是,生物学上独特的双生病毒之间紧密的血清学联系可能要导致病毒鉴定的困难。因此我们可以借助其他方法加以区别。如ACMV不侵染菜豆(Phaseolus vulgaris)和西葫芦(Cucubita pepo),而菜豆金色花叶病毒(Bean golden mosaic virus―BCMV)和南瓜花叶病毒(Souash mosaic virus―SMV)则侵染。在点杂交实验中,ACMV DNA-2探针不与BGMV、番茄金色花叶病毒(Tomato golden mosaic virus TGMVA)或烟草曲叶病毒(Tobacco leaf curf virus―TLCV)以及双生病毒复合侵染的植株浸出液发生明显反应。 核酸杂交检测DNA-1和DNA-2二种基因组DNA的探针均已制备出来,任一种DNA探针都可用于点杂交检测受曲型株系或安哥拉缺陷株系侵染的 N.berthamiana或木薯,而只有DNA-1探针与侵染这两种植物的肯尼亚海岸株系反应强烈。 电镜观察 在电镜下观察病毒粒体和有特点的颗粒状内含体以及纤维环。 PCR检测 由于ACMV在复制时通过双链、环状DNA这一形式,因此它十分适合做多聚酶链式反应。目前已经有人研究和探讨了这种反应在检测方面应用的可能性。 有关检疫规定 非洲木薯花叶病毒是《中华人民共和国进境植物检疫危险性病、虫杂草名录》中规定的一类危险性病害,应加强检疫。禁止疫区进口带病的苗木和块茎。如有特殊需要可限制引进数量,要求出口国出具证书,并经防虫温室试种观察。 |
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