词条 | T2毒素 |
释义 | 简介T2毒素(T2)是由多种镰刀菌产生的一种霉菌毒素。主要污染小麦、大麦、玉米等粮食作物及其制品,对人类健康及畜牧业构成了较大危害。T-2毒素主要影响血液,肝脏,肾脏,胰腺肌肉及淋巴细胞的功能,T-2毒素中毒后的一般临床症状为厌食、呕吐、腹泻、生长停滞、繁殖和神经机能障碍等。 检测器械试剂盒使用T2毒素试剂盒则能够快速而准确的分析样品中T2毒素残留。 本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代真菌毒素检测产品,操作时间短于60min,能最大限度地减少操作误差和工作强度。 试验原理 本试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被T2毒素抗原,样本中T2毒素和此抗原竞争T2毒素抗体,同时T2毒素抗体与酶标二抗相结合,经TMB底物显色,样本吸光值与其含有的T2毒素成负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中T2毒素的含量。 适用范围 可定性、定量检测玉米、大米、豆类、花生、燕麦、饲料等样本中的T2毒素。 检测步骤 1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25℃)平衡30min以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。 2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封,保存于2~8℃。不要冷冻。 3、洗涤工作液在使用前也需回温。 4、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。 5、加标准品/样本:加标准品/样本50l到对应的微孔中,加入T2毒素酶标物50l/孔,再加入T2毒素抗试剂50l/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置室温避光环境中反应30min。 6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤工作液300l/孔,充分洗涤5次,每次间隔30s,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。 7、显色:加入底物液A液50l/孔,再加底物液B液50l/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置室温避光环境反应15~20min。 8、测定:加入终止液50l/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于450nm处(建议用双波长450/630nm检测,请在5min内读完数据),测定每孔OD值。(若无酶标仪,则不加终止液用目测法可进行判定)。 检测方法 检测方法灵敏度、准确度、精密度 试剂盒灵敏度:0.2ppb 回收率:110±15% 精密度:试剂盒的变异系数均小于10% 贮藏保存 贮藏条件及保存期 贮藏条件:保存试剂盒于2~8℃。 保存期:该产品有效期为12个月。 免疫层析亲和柱用途 免疫亲和层析柱可选择性吸附样品液中的T2毒素,从而对T2毒素样品起到非常针对性的纯化作用,过柱净化后的样品液可直接用于液相进行T2毒素含量的检测。 亲和层析柱与HPLC配合使用可达到快速测定的目的,以改善信噪比,可提高检测方法的准确度。 操作程序 ----取出免疫亲和层析柱,将上方塞子取出斜剪断,再插回亲和柱上; ----将柱子与泵流操作架上的玻璃针筒连接固定,处理后的溶液上样; ----去掉亲和柱下方堵头,调节开关,使液体以1d/s的速度流出; ----待液体排干后,更换新玻璃针筒,用10mL水溶液洗涤2次,流速2d/s; ----待液体排干后,更换新玻璃针筒,上样1mL甲醇,用样品瓶/玻璃试管接洗脱液,流速1d/s; ----洗脱后液体可用于检测。 *使用前,免疫亲和层析柱需回至室温(22~25℃)。 *每次上样前都要将上次液体完全排干。 *也适用于GB/T23501-2009及SN/T1771-2006。 贮藏条件及保存期 贮藏条件:保存试剂盒于2~8℃。 保存期:该产品有效期为12个月。 |
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