词条 | ROX-500分子量内标 |
释义 | ROX-500分子量内标(又称分子量内对照, internal lane standards)由16条带有ROX荧光素标记的双链DNA片段组成,分子量分别是:70、80、100、120、140、160、180、200、240、280、320、360、400、450、490、500bp,可于Genescan分析中用作分子量标准物,适用于ABI 377、310、3100、3130、3130xl、3730和3730xl等一系列测序仪和遗传分析仪。 使用与保存每个待检测样品与0.5 ml本产品混合,变性后检测。以ABI 3100遗传分析仪为例,10 ml上样体系中加入0.5 ml本产品,1 ml扩增产物和8.5 ml去离子甲酰胺,95℃变性3分钟,冰浴2分钟即可上样检测。 本品带有荧光标记物,需要避光保存在4℃冰箱。如果长期保存,请冻存在-20℃或更低。避免反复冻融。 技术指标用ABI 3100遗传分析仪,1KV上样电压,进样时间22秒,按照标准上样量,峰值为2000rfu左右(不同使用年限的仪器灵敏度不同,不同使用次数毛细管灵敏度也不同,本数据为本实验室数据),无明显杂峰和双峰、肩峰现象。用来校正分子量范围在100-480的等位基因阶梯(allelic ladder,共220个片段3种荧光分子标记),进样10次,计算每条带的分子量并比较10次结果,每条带的分子量标准差小于0.1bp。 |
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