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词条 PCR-RDB法
释义

PCR是聚合酶链式扩增,RDB是反向点杂交,是将探针固顶在玻璃芯片或尼龙膜上,用于检测扩增产物中是否含有目标基因的技术。此技术较为成熟,在国内应用较多,如HPV分型诊断试剂、地中海贫血诊断试剂等。

PCR-RDB法是将特异的探针分别固定到硝酸纤维素膜或尼龙膜上,再将经PCR特异性扩增的产物(在PCR引物5’端预先进行生物素标记,使扩增产物相应标记有生物素)与之杂交,这样待检样本就会与具有同源序列的探针结合,经洗涤去除未结合的DNA样本,由于待测的DNA样本具有生物素类的标记物,结合了待测DNA的探针点上就带有生物素类的标记物,再经相应的显色反应就能显出杂交信号。这种以膜上固定探针取代固定靶DNA的方式,一次杂交反应可以检测多种靶序列,具有快速简便、敏感度高和特异性强的特点。

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更新时间:2025/2/28 0:03:48