成群分布在曲精小管之间，胞体呈圆形，椭圆形或不规则形，胞体较大，直径约20μm，胞质呈嗜酸性，细胞核呈圆形或卵圆形，常位于中央，染色较淡，有1～2个核仁。

从青春期开始，睾丸间质细胞受垂体前叶嗜碱性细胞分泌的间质细胞刺激素（黄体生成素）的作用，能合成分泌雄性激素，可促进精子的发生和男性生殖器官发育，以及维持第二性征和性功能。