| 词条 | 克隆载体 |
| 释义 | § 克隆载体 克隆载体（Cloning Vector）：通常采用从病毒、质粒或高等生物细胞中获取的DNA作为克隆载体，在载体上插入合适大小的外源DNA片段，并注意不能破坏载体的自我复制性质。将重组后的载体引入到宿主细胞中，并在宿主细胞中大量繁殖。 质粒是染色体外自主复制的遗传因子，多为闭环DNA分子，天然存在于细菌、真菌细胞内，质粒可以自发地从一个细菌迁移进入另一个细菌。宿主细胞指的是目的基因进行克隆的细胞，例如人的生长激素基因导入大肠杆菌进行克隆，大肠杆菌细胞就是生长激素基因的宿主细胞。如果目的基因的宿主是细菌或真菌，通常用质粒做目的基因的载体，特殊情况下用噬菌体做载体；如果宿主细胞是动植物，载体通常选取病毒或染色体DNA构建。我们把经过改造完成的能运送目的基因的载体称为克隆载体。 作为克隆载体最基本的要求是：①具有自主复制能力，否则目的基因就无法进行克隆；②携带易于筛选的选择标记，用于筛选成功的重组DNA，淘汰未重组的空载体；③载体应尽可能小，便于导入细胞和进行繁殖；④使用安全。 迄今为止，已经通过天然质粒、病毒等构建了多种克隆载体，例如1977年Boliver等从天然质粒出发，经删除、融合、转座及重排等操作，构建成功了适合多种用途至今仍广泛使用的克隆载体pBR322，它全长4361bp，含两个抗性基因，用于重组后的筛选，具有天然质粒的复制起始点（图8-1-3）。如果目的基因较大，需要构建病毒克隆载体，常见的是λ噬菌体克隆载体。[1] |
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