DEPC性质简介

焦碳酸二乙酯（DEPC）：DEPC即diethypyrocarbonate，中文名为焦碳酸二乙酯。分子式为C6H10O5，分子量为162.14。是一种强烈但不彻底的RNA酶抑制剂。它通过和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性，从而抑制酶的活性。DEPC可以抑制植物细胞上的NSCC，即nonselective cation channel （非选择性阳离子通道）。是常用的NSCC抑制剂.

DEPC毒性

1．DEPC(diethypyrocarbonate，焦碳酸二乙酯) 是一种高效烷化剂。配置：加0.1% DEPC到去离子水中，混匀过夜，然后高温高压121℃， 20min， DEPC即降解成二氧化碳和水无毒。

2．DEPC有刺激性，对眼睛气道粘膜有强刺激，在操作中应尽量在通风的条件下进行，DEPC毒性并不是很强，但吸入的毒性是最强的，使用时戴口罩，不小心占到手上注意立即冲洗。

3．DEPC是一种潜在的致癌物质，主要是能生成乙酯基衍生物和乙酯类衍生物，其中尿烷是一种已知的致癌物质。

DEPC水泡过一次枪头后还能再用吗?是否每次都要重配？

答：不能再用。每次处理耗材时都要用新配的。

DEPC水用于配制电泳缓冲液和溶解RNA.

DEPC在水中的半衰期

25℃、磷酸缓冲液中其半衰期为4 min（pH 6）、9 min（pH 7）。Tris缓冲液中DEPC的降解会加快，25℃时，半衰期为1.25 min（pH 7.5）、0.37 min（pH 8.2）。

DEPC加入到水中之后并不会立即溶解，而是形成小的球状液滴（类似于油滴），需要彻底搅拌直至液滴消失才算混合均匀。此时的溶液才可以拿去高温除菌除DEPC。一般灭菌15min即可将DEPC彻底除去。（试验所用试剂也可用DEPC处理，加入DEPC至0.1%浓度，然后剧烈振荡10分钟，再煮沸15分钟或高压灭菌以消除残存的DEPC，否则DEPC也能和腺嘌呤作用而破坏mRNA活性）

配制

泡实验器具的DEPC水的配制：1000ml双蒸水中加1mlDEPC，放在1000ml容量瓶中静置4小时后备用。(DEPC在高压时分解为二氧化碳和乙醇，所以，用来处理实验器具的DEPC水，就不能高压)

配75%乙醇的DEPC水的配制：100ml盐水瓶内装40ml双蒸水，加40ulDEPC，37℃过夜，送至高压。（用来配制试剂的DEPC水是可以高压的。）

用途

DEPC是一种有效的核酸酶抑制剂，它能够与很多酶的-NH，-SH或-OH等基团发生反应，从而破坏酶的活性位点。一般，常用浓度为0.1%（1 L水中加入1 mL DEPC）的DEPC来作为RNA酶的抑制剂。比如，进行RNA实验时，要用DEPC处理实验所用的水和各种溶液。

我们通常所说的DEPC（处理）水是指用DEPC处理过并经高温高压消毒的MiliQ纯水。DEPC（处理）水可以用于RNA沉淀的溶解，含有RNA的各种反应体系如反转录、siRNA的退火等，以及其它各种要求无RNase、DNase和proteinase的反应体系。

使用注意事项

1、DEPC可能溶解掉某些塑料枪头，因此，量取DEPC时要用玻璃器具。

2、DEPC处理后的溶液要去除残余的DEPC，一般121℃灭菌15 min即可，也可以将其煮沸15 min以达到去除的效果。可能会残留些许气味，可以放心使用。

3、因为DEPC在Tris、HEPES等缓冲液中极易分解，因此不能直接用DEPC来处理Tris、HEPES等缓冲液。这种情况下，要先用DEPC处理水，然后再用DEPC处理过的水来配制缓冲液。