词条 | 氧化酵素实验 |
释义 | 原理根据细胞色素氧化酵素(cytochrome oxidase)之作用作为细菌组别之区分。 有氧呼吸过程中,氧化酵素(oxidase)对于电子传送系统扮演一重要角色,其可借氧分子将已还原的细胞色素(reduced cytochrome)氧化,产生水或过氧化氢。 好氧菌与部份兼性厌氧菌及微好氧菌均具氧化酵素之作用,本实验有助于区分奈瑟氏菌属(Neisseria)、假单胞杆菌属(Pseudomonas)此二属为氧化酵素阳性(oxidase positive),与肠道杆菌科(Enterobacteriaceae)此科之细菌为氧化酵素阴性(oxidase negative)。 测定细菌产生氧化酵素之能力,可将p-aminodimethylaniline oxalate试剂滴於平板上之菌落,此淡粉红色试剂可作为人工受质,在氧化酵素与游离氧存在下提供电子而被氧化为黑色化合物,使菌落表面呈黑色,表阳性结果。若菌落无颜色变化或呈淡粉红色,表明氧化酵素活性为阴性结果。亦可使用tetramethyl-p-phenylenediamine 2HCl试剂,此试剂为淡蓝色,若菌落呈深蓝紫色,表阳性结果,无颜色变化为阴性结果。 步骤1,将Trypticase soy agar plate以油性笔划分为三区,每区分别标示欲接种之菌名,并编上组别。 2,无菌操作,于各区内分单一划线接种所标示之细菌。 3, 将平板倒放于37℃培养箱,培养24-48小时。 结果滴加2-3滴试剂于测试菌之菌落表面。 观察菌落表面是否在30秒内转变为深蓝紫色,并将结果记录于表格中。 依观察所见,判断各菌产生氧化酵素之能力,并将结果记录于表格中。 |
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