拼音

概述

英文名

血清脂蛋白-α检查(分类 原理 试剂 操作方法)

正常值

临床意义

附注

相关疾病

拼音

xuèqīngzhīdànbái-α

概述

脂蛋白α在肝脏合成，是由载脂蛋白A和载脂蛋白B通过二硫键组成的特殊脂蛋白，成分类似低密度脂蛋白。其主要功能是阻止血管内血块溶解，促进动脉粥样硬化形成。脂蛋白α水平持续升高与心绞痛、心肌梗死、脑溢血有密切关系。因为脂蛋白α与高血压、吸烟、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇等诸因素无明显相关，所以被视为冠心病的独立危险因子。

英文名

Lipoprotein-α

血清脂蛋白-α检查

分类

血液生化检查、脂类测定

原理

用聚苯乙烯微量反应板为固相载体，以apo（a）单克隆抗体（McAb）包被，加入待测标本，使其中的apo（a）与圃相化的McAb结合，洗涤除去未结合的标本中其他蛋白质，再加入酶标记的apo（a）McAb，与结合到固相抗体上的apo（a）作用，洗涤除去未结合的酶标记物。加入酶的相应底物产生颜色反应，显色程度决定于结合在固相载体上的apo（a）量。

McAb应用杂交瘤技术制备，以超速离心结合层析法纯化的Lp（a）为抗原。所制备的McAb应与apoB及纤溶酶原（PMG）无交叉反应。混合数株识别apo（a）上不同抗原位点的McAb，用于建立血清Lp（a）双抗体夹心ELISA法。

试剂

（1）包被缓冲液：0.02mol/L碳酸盐缓冲液，pH9.5。

（2）包被抗体与酶抗体：用McAb混合液，以硫酸铵沉淀法制备抗人apo（a）-IgG，部分作包被用，部分以过碘酸盐法交联辣根过氧化物酶（RZ≥3）得酶标抗体，－20℃保存可稳定数月。

（3）稀释/封闭液：pH7.4缓冲液含磷酸盐0.01mol/L及氯化钠0.15mol/L，临用前取适量缓冲液，加入适量小牛血清及吐温－20。

（4）底物溶液：0.1mol/L柠檬酸及0.2mol/LNa2HPO4缓冲液，pH5.0，临用前每100ml缓冲液中加入邻苯二胺0.1g及30%H2O20.1ml。

（5）终止液：2mol/LH2SO4。

（6）洗涤液：0.15mol/LNaCl，每升含吐温－200.5ml。

（7）参考血清：目前尚无公认的定值血清，可暂用商品（如BM公司产品，1410962）。

操作方法

（1）包被：聚苯乙烯板，96孔。抗apo（a）-IgG用包被液稀释成10μg/ml浓度，每孔加150μg/ml，4℃过夜。

（2）洗板及封闭：包被后的小孔用洗涤液洗3次，每次5min。每孔中加入封闭液0.15ml，37℃放置30min后，再用洗涤液洗3次。

（3）稀释：参考血清1∶200稀释起，用稀释液倍比稀释8管，作标准曲线用。血清标本可稀释成1∶100或1∶2000后复查。

（4）加样：每孔中加入稀释后的参考血清及标本各100μl，留空白孔只加稀释液，37℃1h可用洗涤液洗3次。

（5）加酶标抗体（稀释度因抗体效价而定，例如1∶20000）：每孔100μl，37℃1h。

（6）显色：每孔中加底物溶液100μl，室温（25℃）避光放置15min。

（7）终止反应：每孔中加入终止液50μl。

（8）比色：在酶标比色计上以空白孔校零点比色，波长490nm，读取各孔吸光度（A）。

正常值

免疫透射比浊法：0～1g/L。

临床意义

（1）降低：见于严重肝病。

（2）升高：见于动脉粥样硬化、脑梗死、脑动脉硬化、急性心肌梗死、急性风湿性关节炎、外科手术等。

附注

脂蛋白α水平与人种及遗传有关；性别之间无明显差别，环境、饮食、药物等因素对脂蛋白α水平无明显影响。

相关疾病

急性心肌梗死、脑动脉硬化、脑梗死