免疫双扩散法（double immunodiffusion assay）是指抗原与抗体在同一凝胶中扩散的方法，是观察可溶性抗原与相应抗体反应和抗原抗体鉴定的最基本方法之一。其原理为相应的抗原与抗体，在琼脂凝胶板上的相应孔内，分别向周围自由扩散。在抗原和抗体孔之间，扩散的抗原与抗体相遇而发生特异性反应，并于两者浓度比例合适处形成肉眼可见的白色沉淀线，证明有抗原和抗体反应发生。若将待检抗体做系列倍比稀释，根据白色沉淀线逐渐消失的情况可测定抗体效价。