词条 | BrdU |
释义 | 简称BrdU 英文名5-Bromo-2-deoxyUridine 中文名5-溴脱氧尿嘧啶核苷 用途可代替胸腺嘧啶在DNA合成期(S期),活体注射或细胞培养加入,而后利用抗Brdu单克隆抗体,ICC染色,显示增殖细胞。同时结合其它细胞标记物,双重染色,可判断增殖细胞的种类,增殖速度,对研究细胞动力学有重要意义。 类似物EdU是另外一种胸腺嘧啶核苷类似物。它也能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在复制的DNA分子,通过基于EdU与Apollo荧光染料的特异性反应检测DNA复制活性,通过检测EdU标记便能准确地反映细胞的增殖情况。EdU检测染料只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)即可有效检测,可有效避免样品损伤,在细胞和组织水平能更准确地反映细胞增殖等现象。而BrdU需要变性DNA后才能与抗体结合,破坏了DNA双链结构,影响了Hochest等染色,导致染色弥散,准确性降低等问题(图2),逐渐被EdU取代。 应用这类碱基替代物可以标记细胞分裂产生的时间点。因此,分时掺入BrdU和EdU可以做双标染色观察到不同的时间分裂的细胞。比如:用第一天给药BrdU,第二天给药EdU,之后染色观察到,BrdU阳性的细胞就代表了第一天的,类似的EdU代表第二天。 |
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