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词条 精子免疫荧光技术
释义

精子免疫荧光技术

诊法。免疫标记技术之一 。可用以研究抗精子抗体。包括三个基本步骤:空气干燥后用甲醇固定的精子涂片作为抗原 底物;涂片暴露于待测血清(宫颈黏液、精浆)中;然后接触荧光标记的免疫球蛋白,即可在荧光显微镜下观察到抗原抗体反应。操作方法:取供精者精液0?2ml,用10ml生理盐水洗涤2次,680g离心5分钟。将洗过的精子悬浮在盐水中,调至10×106精子/ml。取1滴精子悬浮液做涂片,电扇下吹30分钟,使之干燥后放入100%甲醇中30分钟以固定干燥的精子。再将其置入磷酸缓冲盐水中(PBS,pH7?2)。晾干涂片后, 加1滴待测血清,将其放在潮湿盒子内,室温下置1小时,然后用PBS将血清冲去,再洗2次,隔10分钟换1次PBS。亦可将涂片与异硫氰酸荧光素(FITC)结合之抗血清孵育30分钟,经多次冲洗,最后浸泡在含10%甘油的磷酸缓冲液中。荧光显微镜下观察,在未稀释的血清中常见不明原因的微弱染色,故滴度大于1∶16时方为阳性结果。

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更新时间:2025/1/31 7:47:00