建于1959年1月30日，由江苏省扬剧团、南京市扬剧团的部分青年演员组成。为全民所有制。属南京市文化局领导。团长陶影，指导员周惠生。剧团的业务组由新文艺工作者和老艺人组成，负责编剧、导演、音乐设计、美术设计、武功教练等，乐队以南京市扬剧团的乐队为基础，吸收少数其他人员。

建团初期，南京市文化局决定暂时不对外公演，制定“扎根补课、再严十分”的艺术培训方针。学习扬州清曲及扬剧曲调和昆曲折子戏，为演员的唱念和表演身段打下扎实的基础。先后排练了《鸿雁传书》、《上金山》、《放许仙》、《断桥》、《安安送米》、《挡马》、《盗草》、《百花赠剑》等。1959年底，剧团随江苏省慰问支边青年代表团赴新疆作慰问演出。U60年4月，剧团创作《义民册》、《借船》参加江苏省首届青年戏曲演员观摩演出，均受到好评。《义民册》由江苏人民广播电台录音，在《剧本》、《江苏戏曲》发表。

1961年剧团开始对外公演。1963年8月，在上海人民大舞台及大众剧场先后演出大型现代戏《东风解冻》、传统剧《三女审子》，观众反映颇好，认为演出风格清新；音乐唱腔的改革既保持扬剧风格，又比传统唱法优美悦耳；舞台作风严肃，演员水平齐整。1964年起，全部上演现代戏。1966年春，剧团在南京人民大会堂演出现代戏《前沿人家》，上海唱片厂灌制了唱片。“文化大革命”初期，剧团仍创作演出了大型现代戏《欧阳海之歌》和《槐树庄》。

剧团共移植、改编、创作大型现代和传统剧目二十余个，中、小型剧目十多个。培养出一批比较优秀的演员。积累了一批有一定水平、受观众欢迎的剧目，初步形成了自己的演出风格。