合成多肽中的醋酸测定法

本法系用液相色谱法测定合成多肽中醋酸或醋酸盐的含量。除另有规定外，按下列方法测定。

对照品溶液的制备 取冰醋酸适量，精密称定，用流动相A-流动相B（95：5）的混合溶液定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液（对照品溶液的浓度可随供试品中醋酸的含量作适当调整）。

供试品溶液的制备 按各论项下的方法制备（取样量应根据其醋酸含量而定）。

色谱条件及系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱（250mm×4.6mm，5μm），以磷酸溶液（在1000ml水中加磷酸0.7ml,用氢氧化钠试液调节pH至3.0）为流动相A，甲醇为流动相B，进行梯度洗脱，流速为每分钟1.2ml；检测波长为210nm；理论板数按醋酸峰计算应不低于2000。醋酸峰的保留时间约在3~4分钟。

测定法 精密量取对照品溶液和供试品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算多肽中醋酸的含量。

时间（分）　流动相A(%)　流动相B(%)

0~5　95　5

5~10　50　50

10～20　50　50

20～22　95　5

22～30　95　5