词条 | 甘露糖阳性选择系统 |
释义 | 植物遗传转化的转化频率通常较低,筛选时必须利用选择标记来保证转化细胞的存活和防止非转化细胞的再生。传统的筛选方法是利用抗生素和除草剂类选择剂,但这些物质对人类和环境的影响还不完全了解,因此,非抗生素筛选系统应运而生。 甘露糖阳性选择系统属于非抗生素筛选系统之一,其原理是:甘露糖不能维持各种外植体的生长。当培养植物细胞添加甘露糖时,它只被转化为6-磷酸甘露糖,不能进一步参与代谢,而积累至毒性水平。科学家克隆编码6-磷酸甘露糖异构酶的基因作选择基因,构建表达载体遗传转化植物,用甘露糖作选择剂,选择基因编码的6-磷酸甘露糖异构酶则可将6-磷酸甘露糖转化为易于糖酵解的6-磷酸果糖。 和传统的遗传转化方法相比,包含甘露糖选择在内的新筛选方法有利于转基因组织的再生和生长,同时使非转基因组织因饥饿而死,而不是杀死它们,称之为正向选择法;传统的抗生素选择法或除草剂选择法将未转化细胞杀死则被叫做负向选择法。正向选择法中高浓度的甘露糖、木糖等可导致相当大的植物毒性,但由于转基因细胞嵌合于坏死组织,在适当的选择剂 浓度时,外植体全部坏死较少,可望提高转基因苗的发生率。正向选择法不使用抗生素和除草剂基因,作为环境友好的选择系统,它可能在转基因植物研究中具有潜在的、广泛的应用前景。 |
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