EnVision法 (enhance labeled polymer system ELPS)

EnVision法又称为ELPS法(enhance labeled polymer system)，抗原—抗体反应结合后，第二抗体上标记有多聚化合物(葡聚糖)酶复合物(EnVision复合物)，与第一抗体结合，进而由酶作用底物进行显色定位。EnVision复合物是利用一种多聚化合物将HRP或AKP和第二抗体(抗鼠或抗兔IgG)同时标记在一个多聚化合物上，即形成酶—多聚化合物—第二抗体巨大复合物。

每1个分子的复合物中约含?o个分子的HRP和10个分子的第二抗体，复合物中的HRP的绝对数量远高于其他复合物(如ABC)，本身已具备高度放大作用，因此EnVision法敏感性显著高于其他方法。复合物中存在多个第二抗体，也增加了该复合物与特异性抗体的结合机会。同时，人体内不存在该多聚化合物，无非特异性干扰，故背景染色浅。此外，染色步骤为两步，且第二抗体孵育时较短，使该方法更省时而简便。

EnVision法操作流程如下。

(1)4弘m常规石蜡切片经烤片后，常规二甲苯、乙醇脱蜡至水，PBS洗3minX3次。

(2)预处理组织切片(可用酶消化或AR或不作任何处理，依一抗质量而定)。

(3)PBS洗3rainX3次。

(4)0．3％H202阻断内源性过氧化物酶15rain，PBS洗3rainX 3次。

(5)适当稀释特异性一抗，37~C孵育几，PBS洗3minX3次。

(6)EnVision复合物(即用型)孵育30min，PBS洗3minx3次。

(7)水洗，复染，常规树胶封片。

(8)结果观察。