简介

含量测定

枸杞多糖的作用原理

简介

枸杞多糖(枸杞提取物)

产品来源：宁夏枸杞干果性状：为深棕色粉末，易吸湿。

规格：枸杞多糖含量：50% UV

枸杞是我国传统名贵中药材，素有“红宝”美称，富含植物多糖、蛋白质、维生素等营养成分。

枸杞多糖是从枸杞中提取而得的一种水溶性多糖。已明确该多糖系蛋白多糖，由阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖、鼠李糖6种单糖成分组成.

经研究表明，枸杞多糖是枸杞子调节免疫、延缓衰老的主要活性成分，可改善老年人易疲劳、食欲不振和视力模糊等症状，并具有降血脂、抗脂肪肝、抗衰老等作用。

含量测定

对照品溶液的制备 取无水葡萄糖对照品25mg，精密称定，置250ml量瓶中，加水适量溶解，稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml中含无水葡萄糖0.1mg)。

标准曲线的制备 精密量取对照品溶液0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml，分别置具塞试管中，分别加水补至2.0ml，各精密加入5%苯酚溶液1m1，摇匀，迅速精密加入硫酸5ml，摇匀，放置10分钟，置40℃水浴中保温15分钟，取出，迅速冷却至室温，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法(中国药典2010年版Ⅰ部 附录V A)，在490nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

测定法 取本品粗粉约0.5g，精密称定，加乙醚100ml。加热回流1小时，静置，放冷，小心弃去乙醚液，残渣置水浴上挥尽乙醚。加入80%乙醇100ml，加热回流l小时.趁热滤过，滤渣与滤器用热80%乙醇30ml分次洗涤，滤渣连同滤纸置烧瓶中，加水150ml，加热回流2小时。趁热滤过，用少量热水洗涤滤器，合并滤液与洗液，放冷，移至250ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置具塞试管中，加水1.0ml，照标准曲线的制备项下的方法，自“各精密加入5%苯酚溶液1m1”起，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含葡萄糖的重量(mg)，计算，即得。

枸杞多糖能够增强免疫功能、降血脂、保护肝脏、抗氧化，抗衰老、抗肿瘤。

枸杞多糖的作用原理

枸杞子多糖对3H一TdR掺入小鼠脾淋巴细胞及Ts细胞的影响：

对3H一TdR掺人脾淋巴细胞的影响：

枸杞多糖（LBP）5mg/kg和10mg/（kg.天）×7天，腹腔注射可明。

显提高ConA诱导作用下3H一TdR掺入脾T细胞值，10mg/kg可使掺入指数达到高峰，比对照组高3倍。而LBP25mg/kg和50mg/kg对脾T细胞转化反应有明显抑制作用。表明LBP对脾T淋巴细胞增殖效应与剂量有密切关系。以LBP提高脾T淋巴细胞转化值最显著剂量10mg/（kg.天）×7天，观察对B 淋巴细胞有丝分裂剂LPS诱导3H一TdR掺入细胞作用的影响。在LPS浓度为50.70和100μg/ml时，LBP对3H一TdR掺入B细胞指数无明显影响，表明LBP对B细胞有丝分裂剂诱导的细胞转化功能不敏感。

对脾抗体形成细胞数的作用：

LBP在5.20mg/（kg.天）×7天可显著增高脾PFC数，5mg/kg剂量可使PFC数达正常免疫对照组的1.4倍。而25.50mg/kg时，则见PFC数明显降低，其中25mg/kg组PFC数为正常对照组的43%。表明LBP对抗体形成细胞数的增强效果有适宜的剂量范围。

对脾Ts细胞功能的影响：

采用超适量SRBC免疫（SOI）诱导Ts细胞法观察到，供体小鼠脾细胞中Ts细胞可使正常免疫小鼠的PFC数抑制63%，表明SOI法可以诱导出对抗体生成细胞产生显著抑制作用的Ts细胞。给予供体鼠LBP5mg/（kg.天）×7天后，受体鼠PFC数比SOI对照组显著下降，说明此剂量对Ts细胞功能有增强作用。当剂量增加到25.50mg/kg时，LBP对Ts细胞功能的增强作用明显下降。

枸杞子多糖对S180荷瘤小鼠细胞免疫功能的影响及其抑瘤作用：

枸杞子多糖对正常小鼠细胞免疫功能的影响：

小鼠腹腔注射LBP5mg/（kg.天），连续7天（do-6），于第7天取脾脏测T淋巴细胞增殖反应。结果表明LBP可明显提高正常小鼠经ConA诱导的脾脏T淋巴细胞增殖反应，其cpm值由对照组的28410±3110提高到给药组的64870±2571。

枸杞子多糖对S180荷瘤小鼠细胞免疫功能的影响及其抑瘤作用：小鼠皮下接种S180肿瘤细胞后2天，腹腔注射LBP10mg或20mg/（kg.天）×7天，于第9天处死小鼠，测瘤重及脾脏T淋巴细胞增殖反应。结果表明LBP10mg和20mg/kg的抑瘤率分别为31%，39%。同时可见LBP10mg组小鼠的T淋巴细胞增殖反应cpm值由未给药组的139±62提高到给药组的5581±783，RPI（Relative roliferationinde×，相对增殖指数）从相当于正常的0.3%提高到24.6%。实验用环磷酰胺（Cy）做阳性对照，1次皮下注射25mg/kg，抑瘤率为47%，T淋巴细胞增殖反应CMP值为165±31。

枸杞子多糖对受环磷酰胺抑制的正常小鼠细胞免疫功能的影响：小鼠在皮下注射Cy25mg/kg同一天开始腹腔注射LBP5mg/（kg.天）×7天，于第7天取脾脏测T细胞增殖反应。结果加LBP后RPI为105%（单独用Cy组小鼠的RPI为正常的33%），表明LBP完全对抗了Cy所造成的细胞免疫功能低下的作用。

枸杞子多糖与环磷酰胺合用的抑瘤作用：

小鼠皮下接种S180 细胞后2天皮下注射Cy25mg/kg，抑瘤率为31%，同时腹腔注射LBP 10m/（kg.天）×7天，则抑瘤率提高到47%，但无显著差异（P>0.05）。当Cy皮下注射l2.5mg/kg时抑瘤率为14%，其瘤重与肿瘤对照组相比无显著差异，如同时合用LBP10mg/（kg.天）×7天，腹腔注射则抑瘤率增至54%，（P<0.01），表明LBP可增强Cy的抑瘤作用。

枸杞子多糖及合并应用厌氧短棒杆菌菌苗对小鼠腹腔巨噬细胞抑制肿瘤增殖活性的影响：

枸杞子多糖给于正常小鼠腹腔注射40mg/（kg.天）×7天 能增强经ConA处理的巨噬细胞抑制肿瘤靶细胞增殖的活性；LBP5.10.20.40mg/（kg.天）×7天并与小剂量（250ug/只）厌氧短棒杆菌菌苗（CorynebacteriumParvum，CP）合并应用，具有明显的协同效应。在LBP浓度为20mg/kg时，效应最为显著，对靶细胞P815及P388增殖的抑制率分别为85.5%和63.6%；CP对照组则为28.1%及24.O%。表明合并应用LBP及CP可减少二者的用量，增强效应，减低CP的毒副作用。LBP主要作用于T细胞的免疫增强剂，能增强CTL，NK细胞的功能；CP则为巨噬细胞刺激剂。实验表明，合并应用作用于

免疫应答不同环节的免疫增强剂可获得协同效应。实验还表明，LBP无论对巨噬细胞在非特异性抗肿瘤或特异性抗肿瘤过程中均具有激活作用。

枸杞子多糖对小鼠白细胞介素-2 活性的增强作用：

在诱导小鼠脾细胞白细胞介素-2（IL-2）的培养液（脾细胞5×l0/ml和ConA4ug/ml）中加入LBP，所制备的含IL-2上清液使成年小鼠胸腺细胞在体外增殖活性（[3H]TdR参入法）升高。老年小鼠IL-2促进淋巴细胞增殖水平显著低于成年。LBP可使老年小鼠IL-2的这种作用显著提高，达到成年小鼠水平。实验表明LBP对IL-2的活性有增强作用并使老年小鼠IL-2活性得到恢复。

枸杞子多糖对老年小鼠免疫功能低下的调节作用：

老年小鼠脾溶血空斑形成细胞（PFC）数明显低于正常成年小鼠水平，下降51%。给于LBP20mg/（kg.天），腹腔注射，7天，可明显提高老年小鼠脾PFC值到正常成年水平。老年小鼠对ConA 诱导下3H一TdR掺入胸腺细胞值也明显降低。给于LBP后掺入值显著提高，在给予LBP 5mg/kg 时可使3H一TdR掺入胸腺细胞值也明显降低。给于LBP后掺入值显著提高，在给予LBP 5mg/kg时可使3H一TdR掺入值提高大约10倍。应用超适剂量SRBC免疫法（SOI）表明，适宜剂量的LBP对老年小鼠抑制性T细胞（Ts）有明显调节作用，增强Ts细胞的活性。

枸杞子多糖对小鼠T、杀伤T和NK细胞的免疫药理作用及对抗环磷酰胺的免疫抑制作用：

LBP5-10mg/kg，腹腔注射，可以提高小鼠脾脏T淋巴细胞的增殖功能，增强CTL（Cy-totoxic）

（T lymphocyte）的杀伤功能，特异杀伤率由33%提高到67%。LBP5mg/kg，腹腔注射，可以增强NK细胞的杀伤功能，杀伤率由12.4%提高到18%。LBP5-10mg/kg可以对抗环磷酰胺（Cy）对小鼠T、CTL和NK细胞的免疫抑制作用；其中T淋巴细胞的相对增殖指数（RPI）由33%提高至105%，Cy对CTL 的抑制率由单用的

51%降低到与LBP合用的19%和36%，NK细胞的杀伤率亦由Cy单用的9.5%提高到15%和16%。这些结果表明LBP增强了正常小鼠和Cy处理小鼠的T细胞介导的免疫反应与NK细胞的活性。

此外，枸杞多糖还能显著增加巨噬细胞C3b和Fc受体的数量和活力，并能减轻醋酸可的松对其的抑制作用。给大鼠灌胃枸杞袋泡茶2ml/只/天，持续2周，可明显提高免疫球蛋白含量（尤其是IgM）和补体活性。