词条 | 原位杂交术 |
释义 | 原住杂交术(in situ hybridization) 在研究DNA分子复制原理的基础上发展起来的一种技术。其基本原理是两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,能过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 双键分子的特点,应带有标记的(有放射性同位素,如3H、35S、32P、荧光素生物素、地高辛等非放射性物质)DAN或 RNA片段作为核酸探针,与组织切片或细胞内待测核酸。(RNA或DNA)片段进行杂交,然后可用放射自显影等方法予以显示,在光镜或电镜下观察目的 mRNA或DAN 的存在与定位;用原位杂交术,可在原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。 此方法有很高的敏感性和特异性,可进一步从分子水来探讨细胞的功能表达及其调节机制。已成为当今细胞生物学、分子生物学研究的重要手段。 原位杂交术简易解释 是根据两条单链核苷酸互补碱基序列专一配对的特点,应用已知碱基序列并具有标记物的RNA和DNA片段即核酸探针,将核酸探针与组织切片或细胞内的待测核酸进行杂交,通过放射自显影处理或免疫组织化学术处理,显示标记物,在光镜下观察目的的mRNA或DNA的存在于定位。 |
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