又称苹果酸-草酰乙酸穿梭系统，胞质中含有苹果酸脱氢酶，可催化草酰乙酸还原为苹果酸，后者可以进入线粒体基质。线粒体基质内则有另一种苹果酸脱氢酶，可催化进入的苹果酸脱氢形成草酰乙酸和NADH+H+，于是胞质内的NADH+H﹢上的H便间接地被转运进入线粒体基质中。草酰乙酸则通过基质和胞质均含有的谷-草转氨酶的作用，从基质返回胞质中。每1分子NADH进入线粒体内膜的呼吸链氧化可产生2.5分子ATP。在心脏、肝、肾等细胞中，胞质中的NADH+H+属于此种穿梭。所以1分子葡萄糖在这些组织中彻底氧化所产生的ATP分子数为32个。