定义

简介

问题探讨(摘要 关键词 英文摘要)

定义

衡量溶液中存在离子所产生的电场强度的量度。

溶液中离子的浓度越大，离子所带的电荷数目越多，粒子与他的离子氛之间的作用越强，离子强度越大。

简介

1921年,G.N.路易斯根据大最实验结果总结出,在稀溶液范围内,影响强电解质离子平均活度系数γ±的决定因素是浓度和离子价数而不是离子的本性,并且离子价数比浓度的影响还要大些。因此他提出了“离子强度”的概念。离子强度（ionic strength）I等于溶液中每种离子i的质量摩尔浓度（mi）乘以该离子的价数（zi）的平方所得诸项之和的一半,通常以I表示。它表达了溶液中离子的电性强弱的程度。

I=1/2*∑b(B)[z(B)]2(2 为z(B)平方).

问题探讨

流动相的离子强度对RP?HPLC中抗生素色谱峰形的影响

摘要

在反相高效液相色谱(RP?HPLC)过程中，流动相的离子强度可显著影响可解离的化合物如抗生素的色谱峰形，原因在于流动相的离子强度较低时，色谱填料的固定相易于过载，使离子化的化合物的色谱峰形呈典型的过载特征——峰形接近直角三角形。随着进样量的增加，色谱区带中高浓度的前半部的保留时间减少，但色谱区带均在同一时刻结束，色谱峰的拖尾因子及峰宽均显著增加，同时被测物与有关物质间的分离也随之变差。选择合适的缓冲盐并适当地增加流动相的离子强度即可显著改善抗生素的色谱峰形，色谱峰的拖尾因子及峰宽均随之降低，同时被测物与有关物质间也更加易于分离。

关键词

RP?HPLC； 抗生素； 色谱峰形； 流动相； 离子强度

英文摘要

Influence of the ionic strength of mobile phase on peak shape　of antibiotics in RP?HPLC

Liu Hao, Wang Hong?wu, Ding Jian?yin and Qiu Shi?lin

(Shanghai Institute for Food and Drug Control, Shanghai 200233;The National Engineering Research Center for Urban Pollution Control,Tongji University, Shanghai 200092)

ABSTRACT The ionic strength of mobile phase can significantly affect the peak shape of ionogenic compounds such as antibiotics in reversed?phase high performance liquid chromatography (RP?HPLC). The influence may be attributed to overloading of ionogenic analytes in lower ionic strength mobile phase. In such phase, peak becomes increasingly right?angled triangle in shape with increasing sample load together with increasing peak width and tailing. The retention time of the high?concentration front decreases with increasing sample load, while the end of the peak tail has a constant retention time, equal to the symmetrical analytical peak. Due to considerably worse peak shapes, poorer resolution between the main component and its related substances might be observed. With the optimal buffer and the increase of ionic strength, significant improvement in peak shape of antibiotics could be achieved and consequently a decrease in the tailing factor, an increase in the apparent column efficiency as well as an efficient resolution were obtained.

KEY WORDS RP?HPLC; Antibiotics; Peak shape; Mobile phase; Ionic strength

据统计，约80%的药物含有碱性官能团，故碱性化合物的反相高效液相色谱(RP?HPLC)行为在色谱学界始终是一个引人注目的研究课题，而具有不同pKa值的碱性药物的RP?HPLC分离在药学界的重要性正日益被关注[1]。然而，由于碱性化合物的保留可随着流动相pH值的不同而产生显著的变化，因而它们的RP?HPLC分离通常具有一定的难度。在某些pH范围内，碱性化合物的色谱峰拖尾，表观柱效(理论板数，n)较低，其原因可能包括色谱柱的过载、碱性化合物与填料表面残余硅醇基的相互作用以及较慢的吸附?解吸附动力学等。绝大多数抗生素同时含有碱性和酸性基团，多为亲水性的两性化合物，故其RP?HPLC行为远较通常的碱性化合物更为复杂。我们在应用现行各国药典[2～4]进行抗生素RP?HPLC分析时发现，有些抗生素的色谱峰形异常——峰形展宽并接近直角三角形，色谱峰的拖尾因子及峰宽均较大，有时甚至影响到被测物与有关物质间的分离。囿于目前的填料制造水平，以硅胶为基质的反相键合相填料的表面实际上是不均匀的，固定相中不可避免地含有少量高能量位点(sites)，这些高能量位点易为可解离的(甚至中性的)化合物所过载(overloading)[5，6]。此外，解离的化合物在固定相表面的相互排斥作用以及较难渗透进入疏水性的固定相中也是可能的原因[7]。众多实验结果已经证实，在线性色谱(linear chromatography)领域，采用RP?HPLC分离可解离的(尤其是碱性的)化合物时色谱柱易于过载，甚至低达10ng(相当于10-6，进样 10μl)的碱性化合物也可使常规色谱柱(150mm×4?6mm)的表观柱效明显降低；减少进样量则可改善色谱峰形并使表观柱效显著增加；过载效应可随着流动相的离子强度(c)的增加而逐渐减弱[8～12]。本课题选取了几个具有代表性的抗生素品种，初步研究了流动相的离子强度对RP?HPLC中抗生素色谱峰形的影响。