PC-12细胞是一个常用的神经细胞株。

来源： Rattus norvegicus (褐家鼠) 肾上腺嗜铬细胞瘤（一种交感神经系统的肿瘤）

形态：多角型细胞 生长特性：贴壁较松，容易成团

注释：PC-12细胞株来源于一种可移植的鼠嗜铬细胞瘤，该细胞对神经生长因子（NGF）有可逆的神经元显形反应，该细胞不合成肾上腺素。

培养液：Ham's F12K （含2 mM L-谷氨酰胺，1.5 g/L NaHCO3）+15%马血清+2.5% 胎牛血清。 （也可用10%马血清和5%的小牛血清）

传代：吸去培养液。 加入新的培养液，用吸管吹下细胞或用手拍打培养瓶或刮下细胞到培养液中，用移液器把细胞吹散。 加适量的细胞到新的培养器皿中。（以1：4为宜，传代期间2-3天更换培养液）

冻存：95%培养液+5%DMSO冻存于液氮。

PC12细胞来源大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤,广泛用于神经系统疾病的体外研究。

PC细胞培养和向神经元诱导分化

pc12细胞是从大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤克隆的细胞株，主要分泌产物为儿茶酚胺类递质包括多巴胺、去甲肾上腺素等。膜上有NGF受体，受生理水平NGF诱导后，它们停止分裂，长出神经突起，分化为具有交感神经元特性的细胞，常被用于分析神经元分化和NGF作用分子机制的研究，也被用于研究生长因子调节神经细胞基因表达改变的机制。

（一）材料和方法

1，pc12细胞的复苏和培养

从液氮罐中取出盛有pc12细胞的塑料螺口小瓶，立即投入37℃温水中，并不时摇动令其尽快融化，然后从37℃水浴中取出塑料螺口小瓶，用酒精消毒后用吸管吸出细胞悬浮液，注入离心管并加入10倍培养液，混合后离心（一千转每分钟，五分钟）除去上清液，再重复用培养液洗一次。然后用培养液稀释成1x十的四次方个每毫升密度的细胞悬液，接种于75平方厘米塑料培养瓶中，每皿十毫升，置于37度含百分之十二氧化碳的培养箱内进行培养。培养液由百分之九十的DMEM、百分之五胎牛血清、百分之五马血清、0.01%谷氨酰胺组成。

2，pc12细胞的扩增

pc12细胞培养5~10天，经0.25胰蛋白酶消化（37度，五分钟）传代，以1x十的四次方个每毫升密度接种于75平方厘米塑料培养瓶中进行扩增培养。

3，体外诱导pc12细胞向交感神经元样细胞分化

取传五代以上pc12细胞，经消化分散后，制成5x十的五次方每毫升密度的细胞悬液，接种于涂有小牛皮胶的35mm塑料培养皿中，没皿2ml，置于36度，10%co2的培养箱内进行培养。培养液由90%DMEM，5%马血清、NGF20ng每毫升和谷氨酰胺0.10g/L组成。每周换液两次，每次更换一半新鲜培养液。

（二）结果

1，pc12细胞 的生长发育和形态学特征

pc12细胞种植后8小时，生长良好的pc12细胞开始分裂增殖并凝聚成团生长，pc12细胞呈圆形，胞体周围有晕光。培养5~10天后，分裂增殖的pc12细胞已形成密集的细胞簇，布满整个培养瓶。

2，体外诱导pc12细胞向交感神经元样细胞分化

分散的pc12细胞在含NGF的培养条件培养3天后，pc12细胞开始停止分裂。并逐渐分化为具有交感神经元特征的细胞，开始长出神经突起，培养5天后，大多数pc12细胞转变为类似于交感神经元的形态，突起逐渐增多并延长，形成稀疏的网络。随着培养时间的延长，交感神经元样细胞的胞体逐渐增大，胞体主干和分支逐渐延长并增粗，经NSE免疫组织化学染色呈阳性反应。