质粒扩增是大量获取质粒的一种化学生物学方法,通常包括将细菌质粒转化到大肠杆菌中,然后从大肠杆菌中收获大量质粒的过程。
细菌铺板:让细菌在LB培养基上生长,培养基上为了防止杂菌生长,会加入抗生素,而含有目标质粒的细菌带有抗生素的抗性,能够正常生长,从而保证板子上长出来的会是目标菌落。
挑选菌落:从LB培养基上挑选菌落备用
质粒转化:将挑好的菌落放到大肠杆菌培养液当中,让大肠杆菌细胞中感染这些细菌,经过这一过程的大肠杆菌细胞被称为感受态细胞
裂解抽提:采用细胞裂解的方式,从大肠杆菌中把目标质粒提取出来
这一实验主要用于获取较多的质粒,质粒扩增需要的源头质粒量非常小,1微克的质粒都已经能够满足扩增的需要,这也使得质粒的使用和赠送变得非常容易。质粒的用途往往是用于转染细胞,通过转染的方式让细胞表达质粒中携带的基因,从而研究该基因对应蛋白的性能。在基础细胞生物学研究中起着非常重要的作用。