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词条 异质性胞核核糖核蛋白
释义

异质性胞核核糖核蛋白(RA33/36)可以出现在疾病的起病阶段,所以有早期诊断价值。

RA33/36抗原的制备及其抗体的检测:用Ehrlich腹水癌细胞提取的抗原检测抗RA 33/36抗体。简述如下,A型玻璃匀浆器破坏细胞膜,保存细胞核,750 g离心5 分钟,取沉淀,弃上清。加入4 ml核悬浮(10 mmol/L pH 7.9 HEPES-KOH缓冲液含有2.5 mmol/L MgCl 25%甘油),搅拌30分钟,加入4 ml破核液(10 mmol/L pH 7.9 HEPES-KOH缓 冲液含有0.88 mmol/L NH4Cl)搅拌30分钟,50 000 g离心20分钟,取上清,弃沉淀 。上清液透析24~48小时,分装,-80 ℃冰箱保存。选用5%浓缩胶,12%分离胶电泳,样品 入浓缩胶前5 mA,进入浓缩胶后提高电流至10 mA,样品进入分离胶后改电流15 mA。电泳结束后,将抗原转印在硝酸纤维膜上。先后加血清、辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG抗体和 底物液显色。凡在蛋白质分子量为33 000和/或36 000区带出现条带者为阳性。

(1)RA患者:抗RA33/36抗体阳性率?。特异性43.5%?。

(2)正常人:健康成人为?。

(3)其他风湿病:阳性率?。

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