基因诱捕载体

报告基因

基因诱捕（gene trap）是基于小鼠胚胎干细胞（ES 细胞）和诱捕载体所建立的一种高通量的基因突变技术。常用于将一个插入型突变引入哺乳动物的基因组中，这一技术通常由基因诱捕载体（gene trap vector），也称报告载体实现。

基因诱捕载体

诱捕载体的主要部件包含：不含启动子的报告基因（reporter gene），剪接受体（splice acceptor, SA），转录终止序列（polyA）等遗传标记。

诱捕载体的特点是： 无启动子的报告基因上游有一个剪接受体位点。当整合到宿主细胞基因组后，在内源性基因的顺式调控元件启动子、增强子的转录活性作用下，通过mRNA 前体的剪接，上游编码基因与报道基因产生融合转录（fusion transcript），融合转录载体在插入位点能够模仿内源基因的表达，使得内源基因表达终止，达到突变内源基因的目的。

报告基因

基因诱捕载体一般带有选择标记和报告基因。1、选择标记通常为药物抗性基因neo。2、报告基因的正常表达则可以鉴定阳性整合克隆：当载体插入到未分化胚胎干细胞，表达报告基因时，其表达产物的特性可以作为鉴定手段，并可定性分析载体在体内的时空表达。报道基因主要有lacZ基因、β-geo基因、绿荧光蛋白基因等几类。

报告基因为基因诱捕提供了筛选、鉴定的方式，其目的在于方便有效地鉴定诱捕克隆。必要时可以联合使用几种报告基因，用以提高诱捕阳性率。