简介

相关资料

简介

细胞内有小核RNA(smallnuclearRNA，snRNA)。它是真核生物转录后加工过程中RNA剪接体（spilceosome）的主要成分。现在发现有五种snRNA，其长度在哺乳动物中约为100-215个核苷酸。snRNA一直存在于细胞核中，与40种左右的核内蛋白质共同组成RNA剪接体，在RNA转录后加工中起重要作用。

柠檬酸法分离大鼠肝细胞核，用14MNaCl-0.05MTris-HCl缓冲液（pH7.6)提取核浆，用2MNaCl-0.05MTris-HCl缓冲液（pH7.6)提取染色质，剩余部分为核仁、核膜和核内核糖核蛋白网状结构，用热酚法提取三部分RNA，用地衣酚法分别测定三部分RNA的含量，用8％聚丙烯酰胺凝胶电泳分析其中核内小分子RNA，可以看出，核浆部分主要为4SRNA，核内小分子RNA主要分布在剩余部分和染色质部分。

相关资料

由非编码小分子RNA（siRNAs,miRNAs）诱导的RNA干涉作为基因功能研究、基因治疗等新工具,目前已成为分子生物学的研究热点。最近,一种新型小分子RNA-piRNAs在老鼠的生殖细胞中被发现,特异性地与Miwi蛋白结合,被认为是精子发育及合子形成过程中必不可少的。本文就piRNAs的发现、遗传特性和可能的作用模式作一综述,并阐述了研究意义和应用前景。

微小RNA（miRNA）是小分子RNA家族中的一员，内源性非编码基因构成的21～23nt单链小RNA分子，在生物进化过程中保持了高度的保守性，通常由Dicer酶从具有发夹二级结构的RNA前体加工而来，miRNA虽然微小，但它在真核生物发育和基因表达中通过与靶mRNA形成完全或不完全互补配对从而扮演着重要角色。2004年，发现了编码和表达miRNA的第一个病毒——埃博拉病毒（epstein-barrvirus，EBV），最近，miRNA又从肉瘤相关疱疹病毒（kaposi’ssarcoma-as-sociatedherpesvirus，KSHV）和人巨细胞病毒（humancytomegalovirus，HCMV）中克隆到，此外，SV40miRNA被认为负调控T抗原（1argeT-antigen，TAg）表达，作者对病毒编码的miRNA及miRNA在最近研究中的预测、表达和功能作一综述。

利用改进的Trizol法首次从鹌鹑血液中提取小分子RNA，比较小分子RNA在组织与血液中的表达差异，为简化小分子RNA的提取程序，提高实验研究效率以及探讨小分子RNA的遗传特性提供可供借鉴的资料。结果发现：①改进Trizol法提取血液中的总RNA，效果显著，条带清晰；②发现血液中只存在一种小分子的miRNAs（18-22bp）；③影响小分子RNA提取效率的关键因素包括样本的新鲜程度和RNA酶的污染。研究结果表明，通过改进的Trizol法提取血液中小RNA方法是可行的，小分子RNA在家禽血液中的表达具有特异性，snoRNAs，piRNAs在血液中不表达。