灵芝中甾醇含量比较高，仅麦角甾醇含量就达千分之三左右。已知从灵芝中分到的甾醇有近二十种，其骨架分为麦角甾醇类和胆甾醇类两种类型，甾醇类化合物有麦角甾醇（ergosterol），麦角甾醇棕榈酸酯（ergosta-palmitate）；麦角甾-7，22-二烯-3-酮（ergosta-7,22-dien-3-one）；羊毛甾-7，9（11），24-三烯-3β，21-二醇（lanosta-7,9(11),24-trien-3β,21-diol）；麦角甾-7，22-二烯-3β-醇（ergosta-7,22-dien-3β-ol）；5α-豆甾烷-3.6-二酮（5α-stigrmastan-3.6-dione）；β-谷甾醇（β-sitosterol）；24-甲基胆甾-7-烯-3β-醇[（24s）-24-methyl-5α-cholest-7-en-3β-ol]；麦角甾4.6,8(14),22-四烯-3酮（ergos-ta-4,6,8(14),22-tetra-en-3-one）;24(s)-24—甲基5α-胆甾-7，16-二烯-3β-醇，[(24s)-24-methyl-5α-cholest-7,16-dien-3β-ol]；异麦角甾酮（iso-ergosteion)；以及麦角甾醇过氧化物（ergosterol peroxide),ergosta-7,22-dien-3β-yl linoleate,5α,8α-epidioxyergosta-6,22-dien-3β-yl lionleate,ergosta-7,22-dien-2β,3α,9α-triol等。

甾醇类化合物的提取分离多以乙醇提取原料，然后用乙醚萃取，再用NaHCO3水溶液萃取乙醚溶液，除去酸性部分，然后用硅胶柱层析分离甾醇类化合物，甾醇类化合物的生理活性报道很少。