简介

应用

鉴定

药理研究

注意事项

其它

简介

【方剂名称】祖师麻注射液【方剂拼音】Zushima zhusheye

【方剂组成】本品为瑞香科植物黄瑞香Dephnl giraldii Nitsche的根皮和茎皮经加工制成的灭菌水溶液。

应用

【功能主治】祛风除湿，活血止痛。用于肢体关节肿胀、冷痛或刺痛，活动屈伸不利，阴雨天加重，舌有瘀斑，脉沉弦者；风湿性关节炎、类风湿性关节炎属上述证候者。

【用法用量】肌内注射，一次1～2ml，一日1～2次。

鉴定

【鉴 别】(1)取本品2ml，置试管中，密塞，用力振摇1分钟，产生蜂窝状泡沫，放置10分钟，泡沫应无明显消失。（2）取本品1ml,加三氯化铁试液2滴，显墨绿色，加25%氢氧化钠溶液2滴，变成棕红色。（3）取本品4ml，置水浴上蒸干，残渣加甲醇3ml使溶解，滤过，滤液浓缩至约0.5ml，作为供试品溶液。另取瑞香素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿－醋酸乙酯－甲酸－乙醚（10：1：1：3）为展开剂，展开，取出，晾干,喷以三氯化铁试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

【含量测定】照高效液相色谱法（附录ⅥD）测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇－0.5%醋酸溶液（30：70）为流动相；检测波长为327nm。理论板数按瑞香素峰计算应不低于2000。对照品溶液的制备精密称取瑞香素对照品10mg，置50ml量瓶中,用水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml中含瑞香素0.2mg）。供试品溶液的制备取本品，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每1ml含瑞香素（C9H6O4）不得少于0.15mg。

药理研究

1.研究祖师麻注射液的抗炎作用。方法:　用蛋清、角叉菜胶、甲醛、佐剂造成大鼠各种急性及慢性关节炎模型，观察肌注40 mg/kg 和20 mg/kg 的祖师麻注射液的对抗作用。结果:　祖师麻注射液对蛋清、角叉菜胶、甲醛、佐剂所致的大鼠关节肿胀，具有明显的抑制作用。

2.观察祖师麻注射液对小鼠巨噬细胞RAW264.7在脂多糖(Lipopolysaccharides, LPS)刺激下分泌血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor, VEGF)及缺氧诱导因子-1(Hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)表达的影响,探讨祖师麻注射液抗血管生成的作用及机制。 方法 :2.1分组 小鼠巨噬细胞RAW264.7经培养后,实验分组如下:(1)祖师麻组7组:给予10μg/ml LPS刺激的同时,分别加入终浓度为218.7 mg/ml、72.9 mg/ml、24.3 mg/ml、8.1 mg/ml、2.7 mg/ml、0.9 mg/ml、0.3 mg/ml的祖师麻注射液;(2)空白对照组:无处理因素;(3)阴性对照组(LPS组):单加10μg/ml LPS。2. 2检测方法 2.2.1 MTT法检测巨噬细胞的增殖 培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,96孔板每孔接种1×10~4个细胞,孵育48 h后,按上述分组进行处理。继续培养48 h后依次加入MTT与DMSO,酶标仪读数测各孔吸光度值。 2. 2 .2ELISA方法检测巨噬细胞VEGF的含量 24孔板每孔接种5×10~4个细胞,孵育48 h后,按实验分组进行处理,祖师麻组取2.3中作用较好的3组,祖师麻注射液终浓度分别为218.7 mg/ml、72.9 mg/ml、24.3 mg/ml。继续培养48 h后收集培养液,离心,取上清,按照ELISA试剂盒说明书操作,检测巨噬细胞分泌VEGF的含量。 2.3 Western Blot方法检测巨噬细胞HIF-1蛋白的表达 以每孔1×10~6个细胞的密度接种细胞于6孔板,培养24 h后,按实验分组进行处理,祖师麻组取2.1中作用较好的3组,祖师麻注射液终浓度分别为218.7 mg/ml、72.9 mg/ml、24.3 mg/ml。培养48 h后,RIPA缓冲液溶解细胞,离心,取上清,进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE);将电泳后的蛋白转移至硝酸纤维素膜(Nitrocellulose Blotting Membranes,NC)上;HIF-1抗体、Ⅱ抗分别与膜孵育;显影,分析条带吸光度值。 结果: 2.1祖师麻对巨噬细胞增殖的影响 MTT法检测结果显示,祖师麻对细胞增殖的抑制率随着药物浓度的降低而下降,抑制率从34.04%(祖师麻218.7 mg/ml)下降至2.28%(祖师麻0.3 mg/ml)。其中218.7 mg/ml、72.9 mg/ml、24.3 mg/ml剂量祖师麻组的吸光度值分别为0.45±0.06、0.54±0.09、0.57±0.12,与阴性对照组(LPS组)0.68±0.20相比较有显著性差异(p0.05或p0.01)。而8.1 mg/ml、2.7 mg/ml、0.9 mg/ml、0.3 mg/ml剂量祖师麻组的吸光度值与对照组相比没有显著性差异(P0.05)。 2.2祖师麻对巨噬细胞分泌VEGF的影响 祖师麻注射液浓度在218.7 mg/ml、72.9 mg/ml和24.3 mg/ml时均可抑制小鼠巨噬细胞RAW264.7在10μg/ml脂多糖刺激下分泌的VEGF增多,其VEGF分泌量分别为1029±175 pg/ml、1575±186 pg/ml、1550±217 pg/ml,与阴性对照组(LPS组)1895±155 pg/ml相比较有显著性差异(p0.05或p0.01)。 2.3祖师麻对巨噬细胞表达HIF-1的影响 Western Blot检测结果显示,祖师麻注射液浓度在218.7 mg/ml、72.9 mg/ml和24.3 mg/ml时均可抑制LPS刺激巨噬细胞RAW264.7对HIF-1的表达,HIF-1的吸光度值分别为1.53±0.10、2.82±0.09、5.89±0.25,与阴性对照组(LPS组)比较,差异有显著性意义(p0.01)。 结论 祖师麻注射液可抑制小鼠巨噬细胞RAW264.7分泌VEGF,其机理与抑制HIF-1的表达密切相关。

注意事项

由于系中药制剂

（1）不宜与其他药物在同一容器内混合使用。

（2）保存不当可能影响质量，所以使用前应对光检查，发现溶液出现浑浊、沉淀、变色漏气时不能使用。

其它

【方剂出处】《中国药典》 《金匮要略》《伤寒论》

【性 状】本品为黄棕色的澄明液体。

【规 格】每支2ml

【贮 藏】密封，避光。