词条 | 总谷胱甘肽测定试剂盒 |
释义 | 谷胱甘肽(GSH)是一种硫醇(SH)化合物,它广泛存在于动物组织、植物组织、微生物和酵母中。 总谷胱甘肽测定试剂盒的测定原理是:试剂盒中含有DTNB:5,5’–二硫代–双–(2–硝基苯甲酸),能和谷胱甘肽(GSH)反应产生2–硝基–5–巯基苯甲酸和谷胱甘肽二硫化物(GSSG),由于2–硝基–5–巯基苯甲酸是一黄色产物,通过测定其在412 nm处的最大吸收可确定样品中谷胱甘肽的含量。GSSG在谷胱甘肽还原酶作用下生成GSH,GSH又和DTNB作用生成2–硝基–5–硫基苯甲酸,利用这一循环反应可提高总谷胱甘肽测定的灵敏度。 总谷胱甘肽测定试剂盒含有多种试剂,测定总谷胱甘肽含量浓度范围:1μM-100μM。 反应原理:(如图) 总谷胱甘肽浓度的计算使用以下公式(a): pseudo-end point法: 总谷胱甘肽=(O.D.sample-O.D.blank)/Slope(b) kinetic法: 总谷胱甘肽=(Slope(c)sample- Slope(c)blank)/ Slope(b) *(a)由于这个公式所得数值是处理后的样品中总谷胱甘肽的量,如果需要知道细胞或组织中实际具体的谷胱甘肽的浓度,还需要做进一步的计算。由pseudo-end point法或kinetic法所制备的标准曲线的斜率。 (b)标准曲线的斜率 (c)kinetic反应的斜率 特点: 1、适合于比色分析; 2、可测定总谷胱甘肽(GSH+GSSG); 3、灵敏度高; 4、快速、省时,整个实验可在30分钟内可完成。 用途:可用于检测细胞、组织、血浆、血清、红血球、植物等样品中的GSH;另外在样品中加入triethanolamine和2-vinylpyridine,可单独检测二硫代谷胱甘肽(GSSG)的量。 |
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