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词条 总谷胱甘肽测定试剂盒
释义

谷胱甘肽(GSH)是一种硫醇(SH)化合物,它广泛存在于动物组织、植物组织、微生物和酵母中。

总谷胱甘肽测定试剂盒的测定原理是:试剂盒中含有DTNB:5,5’–二硫代–双–(2–硝基苯甲酸),能和谷胱甘肽(GSH)反应产生2–硝基–5–巯基苯甲酸和谷胱甘肽二硫化物(GSSG),由于2–硝基–5–巯基苯甲酸是一黄色产物,通过测定其在412 nm处的最大吸收可确定样品中谷胱甘肽的含量。GSSG在谷胱甘肽还原酶作用下生成GSH,GSH又和DTNB作用生成2–硝基–5–硫基苯甲酸,利用这一循环反应可提高总谷胱甘肽测定的灵敏度。

总谷胱甘肽测定试剂盒含有多种试剂,测定总谷胱甘肽含量浓度范围:1μM-100μM。

反应原理:(如图)

总谷胱甘肽浓度的计算使用以下公式(a):

pseudo-end point法:

总谷胱甘肽=(O.D.sample-O.D.blank)/Slope(b)

kinetic法:

总谷胱甘肽=(Slope(c)sample- Slope(c)blank)/ Slope(b)

*(a)由于这个公式所得数值是处理后的样品中总谷胱甘肽的量,如果需要知道细胞或组织中实际具体的谷胱甘肽的浓度,还需要做进一步的计算。由pseudo-end point法或kinetic法所制备的标准曲线的斜率。

(b)标准曲线的斜率

(c)kinetic反应的斜率

特点:

1、适合于比色分析;

2、可测定总谷胱甘肽(GSH+GSSG);

3、灵敏度高;

4、快速、省时,整个实验可在30分钟内可完成。

用途:可用于检测细胞、组织、血浆、血清、红血球、植物等样品中的GSH;另外在样品中加入triethanolamine和2-vinylpyridine,可单独检测二硫代谷胱甘肽(GSSG)的量。

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更新时间:2025/2/25 1:38:02