字吉夫，号蒙泉，广西柳州府马平县人。生于正德五年（1510），卒于万历初年，为明代柳州八贤之一。

嘉靖二十年（1541年）进士，选庶吉士。散馆后，任授礼科给事中、户科右给事中等职。此职虽品秩不高，但因掌管抄发章疏、稽察违误，其权颇重。也正因为如此，最易得罪朝廷弄臣。

嘉靖二十七年（1548），徐养正与户科都给事中厉汝进、给事中查秉彝、刘起宗、刘禄等联名上奏朝廷，揭发权奸严嵩之子严世蕃“窃弄父权，嗜贿张焰，词连仓场”的丑行，结果触怒严嵩，徐养正被矫诏廷杖六十，谪贬为云南通海县典史，乾隆《马平县志》称其“与海忠介（海瑞）齐名”，《柳州八贤祠记》说他“锄奸之志，壮于赵清献（赵汴）”，指的就是这件事。

此后，徐养正由通海典史量移为广东肇庆府推官，历升贵州提学佥事，在贵州任职期间丁外艰返家守制。嘉靖三十三年服满起补云南按察司佥事，提督学校。他召集学生于五华书院，教以忠孝大节，并亲自撰写《范运吉传》，以激励学子百折不挠之志。当时，云南布政使徐樾在元江被人刺杀，久未破案。徐养正请准前往办案，成功缉凶法办，其谋略的人也获得了同僚和上司的认为。

嘉靖三十四年（1555），迁南京任光禄寺少卿，又升尚宝卿。此时严世蕃以工部侍郎兼管尚宝司事，徐养正“不欲与同列，请告归”。严嵩倒台、严世蕃伏法后，徐养正才起为南京通政使司右参议，历任通政使司右通政、南京光禄寺卿。嘉靖四十四年转南京户部右侍郎，申明部运规则。嘉靖四十五年晋升为户部左侍郎，此为“入赞庙堂，行秉枢要”之职，陆树声等同僚送徐养正入京任职，殷殷以“足国裕民”相期望。隆庆二年（1568年）三月，升任南京工部尚书。以丁内艰守制归，服阙，抚按会荐朝宁侧席，忽遇疾卒于家。赠宫保，谕祭葬。著有《蛙鸣集》。