词条 | 饲养层细胞 |
释义 | 科技名词定义中文名称: 饲养层细胞英文名称: feeder layer cell 定义: 在细胞培养中起分化抑制作用的单层贴壁细胞 所属学科: 细胞生物学(一级学科) ;细胞培养与细胞工程(二级学科) 所谓滋养层细胞就是指一些特定细胞(如颗粒细胞、成纤维细胞、输卵管上皮细胞等已在体外培养的细胞),经有丝分裂阻断剂(常用丝裂霉素)处理后所得的细胞单层。是细胞培养,尤其是胚胎干细胞培养常用的生长增值促进剂和分化抑制剂。 饲养层影响因素饲养层的影响,主要体现在饲养层种类、丝裂霉素处理滋养层的时间、饲养层细胞的代数和饲养层细胞的密度等。动物种类不同对饲养层种类的要求也不同。 饲养层种类STO PMEF: 对各种动物都较适宜,,但最可靠的方法还是根据动物种类筛选最佳饲养层为宜。有研究表明,PMEF比STO更适合用于小鼠ES(胚胎干细胞)的培养。 UE(子宫上皮细胞) BRL(大鼠肝细胞)等 动物种类需要经过筛选来确定最适宜该种动物ES分离克隆的饲养层 丝裂霉素处理滋养层的时间目前丝裂霉素(常用有丝分裂阻断剂)处理时间在小鼠成纤维细胞上一般要求为:在37摄氏度,5%二氧化碳饱和温度的条件下处理24h,时间过短达不到预定目的,成纤维细胞不能被成功地抑制住,时间过长则使细胞老化,活性下降,分泌因子的能力降低,从而直接影响ES细胞增殖和分化的抑制。同时处理完的清洗工作也很重要,一般要求用无该镁PBS冲洗4~5遍,以确保丝裂霉素的彻底清除。 饲养层细胞的代数及密度以小鼠成纤维细胞为例,选3~5代,密度为10^6-10^7个/ml为宜,代数过低所含杂细胞太多,代数过高则细胞活力降低。 |
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