uracil-N-glycosylase

尿嘧啶-N- 糖基化酶(UNG)酶

原理：UNG酶的作用原理是选择性水解断裂含有dU的双链或单链DNA中的尿嘧啶糖苷键，形成的有缺失碱基的DNA链，在碱性介质以及高温下会进一步水解断裂，从而被消除.UNG酶的最佳活性温度为50℃，95℃灭活。

作用：为保证PCR结果的准确性，要预防非特异性PCR扩增和污染。常用的措施是使用UNG酶(Uracil-N-Glycosylase)和Taq酶热启动。PCR反应最常见, 最重要的污染物是PCR产物,防污染热启动PCR试剂盒以dUTP取代dTTP，所以PCR产物都是含有dU的DNA链。在PCR开始前增加50℃的保温步骤，UNG酶即可将反应体系中已有的U-DNA污染物中的尿嘧啶碱基降解，并在随后变性这步的条件下DNA链断裂,消除由于污染DNA产生的扩增，从而保证扩增结果的特异性，准确性。同时UNG酶被灭活,不会再降解新扩增的产物U-DNA。

高品质的UNG酶可以消除高达108的U-DNA产物，和热启动Taq酶一同用于建立含有UNG/dUTP防污染体系的热启动PCR反应系统。

*UNG酶特征

· 克隆有Ecoli K12 Uracil-N-Glycosylase 基因的大肠杆菌经诱导表达后，再经三次过柱纯化分离出来的重组蛋白。分子量25.66 KDa。

· 反应条件： 50 ℃ ，2 分钟；反应 buffer: 20mM Tris-HCl(PH:8.0); 1mM EDTA; 1mM DTT 。