简介

体液免疫测定法

皮肤试验（皮试）(中和反应的皮肤试验 超敏反应的皮肤试验)

细胞免疫测定法

标记免疫技术

放射免疫技术

酶联免疫吸附试验

简介

免疫防治技术，是以免疫学理论为基础的实验操作技术。它已广泛应用于各种传染病、免疫性疾病、肿瘤的诊断与防治。

体液免疫测定法

某些细菌抗原与对应抗体在体内结合时，可出现杀菌、溶菌等现象。抗原与对应抗体在体外结合时，由于抗原的物理性状和参加物质（电解质、补体等）的不同，可出现凝集、沉淀、补体结合等反应。由于抗体存在于血清等体液中，一般都采用血清进行抗原抗体反应（又称血清反应）试验。

皮肤试验（皮试）

借助于抗原与抗体或抗原与致敏淋巴细胞在皮肤的反应而进行诊断的免疫学试验。根据反应机制可把皮试分为下述两大类：

中和反应的皮肤试验

例如锡克氏试验系白喉毒素皮内试验法，用以调查人群对白喉有无免疫力。其方法是：用一定量白喉毒素注射到受试者前臂的皮内，如于24～28小时后局部红肿，直径达1～2厘米，即为阳性反应，表明受试者没有免疫力;如果局部不出现红肿，则为阴性反应，表明受试者血清中含有足够量的抗毒素抗体，能中和注入的毒素，因而有免疫力。又如狄克氏试验是用链球菌红斑毒素作皮肤试验，用以测定对猩红热有无易感性。

超敏反应的皮肤试验

分迟发型和速发型两种：

迟发型超敏反应皮试

体内测定病人细胞免疫的重要方法。阳性者在抗原注入皮肤后48～72小时内，局部呈现红肿。常用的生物性抗原是由病原体提制的抗原，如结核菌素、白色念珠菌素、皮肤毛癣菌素、链激酶-链道酶、腮腺炎病毒皮试抗原等。此法的优点，是受试者可能在过去接触抗原的过程中已被致敏，检查时可以直接进行皮试，不需要致敏的过程。缺点是受试者过去接受抗原的量与时间不同,即致敏情况不同,因而皮肤反应个体差异大，往往对同一受试者须同时用多种抗原进行皮试，才能判断其细胞免疫功能。常用的化学抗原为2，4-二硝基氟苯(DNFB)。用这类抗原作皮试的优点,是可使大批受试者同时接受等量的从未接触过的抗原刺激，便于比较个体间的差异，测出机体细胞免疫应答的整个环节;其缺点是皮试前必须有2～3周的致敏过程，所需时间过长，而且会引起强烈的反应。这类抗原不宜用于儿童。此外，也用植物血凝素(PHA)作皮试,以测定人体的细胞免疫功能。

速发型超敏反应皮试

用于测定病人的体液抗体，尤其是lgE。例如,在注射青霉素或抗血清进行治疗之前，先把小量稀释的制剂注射到病人皮内，如果病人体内有参与过敏反应的lgE,10～30分钟注射处即呈现红肿，为阳性反应。这一试验原理可用于检测速发型超敏反应(变态反应)的变应原

细胞免疫测定法

用体内试验和体外试验测定细胞免疫功能的方法。体内试验主要是作皮试，测定迟发型超敏反应（见上节皮肤试验），常在诊断肿瘤或免疫缺陷病时使用。体外试验的方法有淋巴细胞分离技术、淋巴细胞转化试验、巨噬细胞抑制试验、玫瑰花结形成试验（包括总数 E玫瑰花结试验）、吞噬试验、四唑氮蓝试验、嗜硷粒细胞脱粒试验、淋巴细胞毒性试验以及组织定型试验和组织配型试验等。

标记免疫技术

用各种标记物标记抗原（或抗体），测定相应的抗体（或抗原）的方法。这种技术具有高度敏感性和特异性，因而得到广泛应用。根据标记方法的不同，主要分为荧光抗体技术（在抗体上标记荧光色素）、放射免疫测定（在抗原或抗体上标记放射性同位素）和酶联免疫吸附试验（在抗原或抗体上结合适当的酶）。荧光抗体技术和放射免疫测定虽然应用较广，但又各有缺点：前者操作时间长，肉眼观察结果不可靠，也不能定量和自动化；后者自动化设备价格太高，放射性同位素试剂的半衰期很短，而且会危及人体的健康。酶联免疫吸附试验具有上述两法的优点而无其缺点，是一种敏感、快速而简便的方法。

放射免疫技术

将高灵敏度的同位素示踪法和高特异性的抗原抗体免疫化学反应结合使用的技术。它由于兼备上述两种技术的优点，近20年来，已成为发展迅速、用途广泛的定性、定量和定位的检测方法。选用适当的放射性同位素标记抗原，并与限量的抗体结合，形成可逆性的标记抗原－抗体复合物。如果加入待测的非标记抗原，则标记抗原与非标记抗原共同争夺限量抗体，最后达到平衡状态。加入的非标记抗原越多，标记抗原与抗体的结合就越少。

放射免疫技术已广泛应用于测定各种激素、肿瘤相关抗原（甲胎蛋白、癌胚抗原）、药物（地高辛、吗啡等）、病毒抗原（乙型肝炎表面抗原）以及lg等，其灵敏度可达10(～10(克/毫升，为目前最灵敏的分析方法，并有自动化设备。

酶联免疫吸附试验

简称酶标法，是20世纪70年代新开展的一项免疫血清学技术。当抗原或抗体结合到固相载体表面时，仍能保持自己的免疫活性。把抗原或抗体与酶的结合物再与相应的抗体或抗原结合，即可根据加入酶底物的颜色来判定有无相应的免疫反应。颜色的深浅与标本中相应抗体或抗原的量成正比。酶标法和放射免疫技术同是既特异又敏感的方法。

酶标法中最常用的是间接法和双抗体夹心法。间接法用于测定抗体。双抗体夹心法用于测定抗原。另外，还有与放射免疫试验相似的竞争法，即利用抗原对抗体的竞争性结合来检测未知的小分子抗原或半抗原。

酶标法具有特异、敏感、快速、简便和经济等特点，原则上可用于检测一切抗原、半抗原和抗体。目前已用酶标法测定血清蛋白质、肿瘤抗原、激素、药物、各种微生物和寄生虫的抗原，以及上述各种抗原所产生的相应抗体。在临床诊断、疾病普查、法医鉴定、兽医检查、植物病害检验等方面应用广泛。