| 词条 | Taq聚合酶 |
| 释义 | 命名Taq聚合酶是一种耐热的DNA聚合酶，由于发现于水生栖热菌（Thermus aquaticus）内，故命名为Taq聚合酶（Taq polymerase），也称为TaqDNA聚合酶，简称Taq酶或Taq。Taq聚合酶常见于PCR技术，用于大量扩增DNA片段。 应用水生栖热菌是一种生长在温泉、蒸汽管道等处的细菌，它体内的Taq聚合酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，这在需要高温环境的PCR反应中有着重要意义。因此Taq聚合酶取代了之前常用于PCR反应的大肠埃希菌中的DNA聚合酶。PCR反应中应用Taq聚合酶，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷，大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。 一般适用于DNA片段的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定、平末端加A等，产物可直接用于T-A载体克隆。 热稳定性及最适延伸温度Taq聚合酶在97.5°C时的半衰期为9分钟。它的最适温度为75-80°C，72°C时能在10秒内复制一段1000bp的DNA片段。这种较高的酶活性有明显的温度依赖性。低温下，TaqDNA聚合酶表现活性明显降低，90°C以上时合成DNA的能力有限。 低保真性Taq聚合酶的缺点之一为催化DNA合成时的相对低保真性。它缺乏3’→5’核酸外切酶的即时校正机制，出错率为1/9000。 酶单位1单位（U）Taq DNA 聚合酶活力定义为在74°C、30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不容物质所需的酶量。 |
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